咖啡酸苯乙酯對結(jié)腸癌HT-29細胞JNK-paxillin信號通路的調(diào)控.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：研究不同濃度下咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester CAPE)對結(jié)腸癌HT-29細胞增殖的影響；觀察CAPE對結(jié)腸癌細胞JNK（c-Jun-N-terminal-kinase）信號傳導通路中相關基因樁蛋白（paxillin）表達的作用，尋找其作用靶點，進一步闡明CAPE抗腫瘤作用的分子機制。
　　方法：體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌細胞株（HT-29），取對數(shù)生長期細胞，將其接種于細胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中，待

2、細胞完全貼壁后，吸棄原培養(yǎng)液；依次加入濃度為(0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、7.5μg/mL、10.0μg/mL)的CAPE；采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法觀察不同濃度的CAPE在不同時間段(24h、48h、72h)對HT-29細胞生長的抑制率；提取總蛋白，以Western blot法檢測HT-29細胞中JNK及paxillin兩種蛋白在不同濃度的CAPE作用下表達量的改變。
　　結(jié)果：1.10μg/mL的CA

3、PE作用72h后對HT-29細胞的抑制率達60.03％，明顯高于2.5μg/mL作用72h后28.93%的抑制率(P<0.01)，也明顯高于10μg/mL作用24h后36.74%的抑制率(P<0.01)；2．CAPE在(2.5～10.0)μg/mL濃度范圍內(nèi)對 HT-29細胞的生長均有抑制作用,且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴關系和時間依賴效應；3．隨著 CAPE濃度的增加，JNK、 paxillin蛋白表達水平降低，10μg/mL的CAPE作用2

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