PKCγ在中樞神經(jīng)中的分布與作用機理的探索.pdf

1、蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)是重要的細胞內信號轉導分子，但PKC的γ亞單位在大鼠神經(jīng)系統(tǒng)的作用機理目前還不十分明了，對PKC的γ亞單位研究將有助于為闡明PKCγ在痛信息傳遞和/或調節(jié)中的作用機制提供理論依據(jù)。本課題從不同角度研究PKCγ的作用機理，以期為闡明PKCγ在痛信息傳遞和/或調節(jié)中的作用機制提供理論依據(jù)。內容包括以下四個方面： 第一部分：應用PKCγ特異性抗體的免疫細胞化學染色技術觀察蛋白激酶C

2、γ亞單位(PKCγ)在大鼠神經(jīng)系統(tǒng)內的定位分布。研究發(fā)現(xiàn)PKCγ陽性神經(jīng)元廣泛分布于大鼠神經(jīng)系統(tǒng)，密集、濃染的PKCγ陽性神經(jīng)元主要見于大腦皮質、海馬、杏仁復合體、小腦皮質、耳蝸腹側核和耳蝸背側核。本研究的結果為探討PKCγ在神經(jīng)系統(tǒng)信號轉導過程中的作用提供了形態(tài)學證據(jù)。 第二部分：研究大鼠延髓背角和脊髓背角淺層內蛋白激酶Cγ亞單位(PKCγ)陽性神經(jīng)元向中縫蒼白核(NRP)的投射。采用熒光金(FG)逆行追蹤和PKCγ免疫熒光組

3、織化學染色相結合的雙標記方法。在延髓和脊髓背角的Ⅰ～Ⅲ層內可見FG逆標神經(jīng)元；PKCγ陽性神經(jīng)元主要分布于延髓和脊髓背角的Ⅱ層內側部及Ⅱ、Ⅲ層交界處，Ⅰ、Ⅱ工層內較少。提示延髓和脊髓背角淺層向NRP投射的神經(jīng)元是PKCγ神經(jīng)元，提示PKCγ在向NRP傳遞的信息的通路中可能發(fā)揮重要作用。 第三部分：應用免疫熒光組織化學雙標記染色方法研究PKCγ在延髓和脊髓背角淺層與PV，CB，CR的共存關系。結果提示大部分PKCγ，CB，CR和P

4、V樣免疫陽性神經(jīng)元分布于Ⅱ層，其中也有少量神經(jīng)元分布于Ⅰ層和Ⅲ層。結論提示PKCγ與鈣調蛋白的共存神經(jīng)元在口面部傳遞痛信息的通路中可能發(fā)揮重要作用。 第四部分：探討大鼠坐骨神經(jīng)切斷模型脊髓背角內PKCγ的變化及意義。在坐骨神經(jīng)切斷后2、5、10、15、20、30、40、60d，取脊髓背角，應用免疫組織化學方法進行染色，圖像分析軟件測量并比較脊髓背角手術側和對照側的免疫強度。從第2天開始，手術側脊髓背角L4-L5節(jié)斷PKCγ免疫陽