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1、該論文的主要目的為:1.探索LPA與急性心肌硬死的關(guān)系,探討LPA在心臟中的病理生理作用.2.研究LPA在心臟組織和細(xì)胞中的分布情況.方法:1.利用滴金免疫技術(shù)建立檢測(cè)血清LPA的方法,測(cè)定正常人和心?;颊哐錖PA水平.(1)以膠體金為載體,物理吸附LPA制備完全抗原,免疫家兔6個(gè)月,共免疫10次,制備LPA多克隆抗體.采集抗血清,用辛酸硫酸銨純化.(2)確定滴金免疫法抗原抗體適合的工作濃度,建立滴金免疫法測(cè)定血清LPA含量.(3)1
2、2例正常人血清和2001年在該院CCU病房住院的24例急性心?;颊哐遄鳛檠芯繉?duì)象,分別測(cè)定發(fā)病后8小時(shí),24小時(shí),48小時(shí),72小時(shí),7天的LPA水平.血清樣本的處理參考Tigyi從白蛋白中提取LPA的方法提取血清LPA,再測(cè)定其含量.還測(cè)定34例高脂血癥病人血清LPA水平.(4)顯色點(diǎn)的定量分析.顯色點(diǎn)用Plustek,OpticPro UT12掃描儀掃描后,用分析軟件Total.labV1.11(網(wǎng)址:www.totallab.c
3、om)定量分析.每個(gè)顯色點(diǎn)像素強(qiáng)度取五次重復(fù)積分的平均值.實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組LPA水平以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,SPSS統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行t-檢驗(yàn),P值<0.05為顯著性差異.2.免疫組化法研究心臟細(xì)胞中LPA的分布情況.(1)取培養(yǎng)的SD乳鼠心肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞,制備細(xì)胞爬片.(2)應(yīng)用LPA多克隆抗體,對(duì)細(xì)胞爬片作免疫組化分析.結(jié)論:該文的測(cè)定LPA的方法簡(jiǎn)便、快速,可為探索LPA與多種疾病的關(guān)系提供新的研究方法.急性心肌梗死病人血清LPA水平
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