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文檔簡介
1、目的:在體外評估CELECOXIB聯(lián)合ZD55-IL-24選擇性殺傷尿路上皮細(xì)胞癌細(xì)胞的能力,探討膀胱癌治療的新方法。
方法:MTT法檢測CELECOXIB不同濃度,不同時間對T24和HUVEC細(xì)胞的生長抑制。相差顯微鏡觀察CELECOXIB對細(xì)胞凋亡的影響。熒光顯微鏡下觀察ZD55-EGFP對T24和HUVEC細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。RT-PCR法測定IL-24mRNA在不同細(xì)胞中的表達(dá)情況。MTT法檢測CELECOXIB聯(lián)合Z
2、D55-IL-24對T24和HUVEC細(xì)胞增殖的抑制作用。流式細(xì)胞術(shù)檢測其對T24和HUVEC凋亡的影響。所得數(shù)據(jù)使用SAS統(tǒng)計軟件分析。
結(jié)果:CELECOXIB對T24細(xì)胞有明顯抑制作用,而對HUVEC細(xì)胞抑制作用不明顯。這種抑制有劑量和時間依賴性。同HUVEC細(xì)胞組、空白組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。CELECOXIB處理48h后,T24貼壁細(xì)胞漸減少。細(xì)胞核皺縮、靠邊。但是HUVNEC細(xì)胞形態(tài)變化不明顯。0.
3、5感染復(fù)數(shù)的ZD55-EGFP在感染細(xì)胞24小時后可觀察到不同強(qiáng)度的熒光。隨時間的增加,熒光強(qiáng)度也增加。但是,在相同時間下T24細(xì)胞中的熒光強(qiáng)度明顯高于HUVEC細(xì)胞。RT-PCR結(jié)果表明,ZD55-IL-24轉(zhuǎn)染細(xì)胞后相同時間下。T24中IL-24mRNA表達(dá)量高于HUVEC中(P<0.05)。T24細(xì)胞組中聯(lián)合用藥組抑制率明顯高于其它組,且呈時間依賴性。差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。T24細(xì)胞各組的抑制率也明顯高于HUVEC組(
4、P<0.05)。流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示T24細(xì)胞組中,聯(lián)合用藥組凋亡率最高。T24細(xì)胞組凋亡率明顯高于HUVEC組(P<0.01)。
結(jié)論:CELECOXIB對尿路上皮癌T24細(xì)胞具有明顯的生長抑制作用,且抑制作用具有時間劑量依賴關(guān)系。ZD55能夠轉(zhuǎn)染T24尿路上皮癌細(xì)胞和HUVEC人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,但對T24細(xì)胞具有較高轉(zhuǎn)染效率。ZD55-IL-24轉(zhuǎn)染后T24細(xì)胞能持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)IL-24。與單一藥物相比,CELECOX
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