選擇性環(huán)氧化酶2抑制劑塞來昔布聯(lián)合含靶向基因白介素24的溶瘤腺病毒抗膀胱癌作用的體外研究.pdf

1、目的：在體外評估CELECOXIB聯(lián)合ZD55-IL-24選擇性殺傷尿路上皮細胞癌細胞的能力，探討膀胱癌治療的新方法。
　　 方法：MTT法檢測CELECOXIB不同濃度，不同時間對T24和HUVEC細胞的生長抑制。相差顯微鏡觀察CELECOXIB對細胞凋亡的影響。熒光顯微鏡下觀察ZD55-EGFP對T24和HUVEC細胞的轉(zhuǎn)染效率。RT-PCR法測定IL-24mRNA在不同細胞中的表達情況。MTT法檢測CELECOXIB聯(lián)合Z

2、D55-IL-24對T24和HUVEC細胞增殖的抑制作用。流式細胞術(shù)檢測其對T24和HUVEC凋亡的影響。所得數(shù)據(jù)使用SAS統(tǒng)計軟件分析。
　　 結(jié)果：CELECOXIB對T24細胞有明顯抑制作用，而對HUVEC細胞抑制作用不明顯。這種抑制有劑量和時間依賴性。同HUVEC細胞組、空白組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。CELECOXIB處理48h后，T24貼壁細胞漸減少。細胞核皺縮、靠邊。但是HUVNEC細胞形態(tài)變化不明顯。0.

3、5感染復(fù)數(shù)的ZD55-EGFP在感染細胞24小時后可觀察到不同強度的熒光。隨時間的增加，熒光強度也增加。但是，在相同時間下T24細胞中的熒光強度明顯高于HUVEC細胞。RT-PCR結(jié)果表明，ZD55-IL-24轉(zhuǎn)染細胞后相同時間下。T24中IL-24mRNA表達量高于HUVEC中(P<0.05)。T24細胞組中聯(lián)合用藥組抑制率明顯高于其它組，且呈時間依賴性。差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。T24細胞各組的抑制率也明顯高于HUVEC組(

4、P<0.05)。流式細胞術(shù)檢測結(jié)果顯示T24細胞組中，聯(lián)合用藥組凋亡率最高。T24細胞組凋亡率明顯高于HUVEC組(P<0.01)。
　　 結(jié)論：CELECOXIB對尿路上皮癌T24細胞具有明顯的生長抑制作用，且抑制作用具有時間劑量依賴關(guān)系。ZD55能夠轉(zhuǎn)染T24尿路上皮癌細胞和HUVEC人臍靜脈內(nèi)皮細胞，但對T24細胞具有較高轉(zhuǎn)染效率。ZD55-IL-24轉(zhuǎn)染后T24細胞能持續(xù)穩(wěn)定表達IL-24。與單一藥物相比，CELECOX