免疫基因多態(tài)性與漢族人群類風濕關節(jié)炎遺傳易感性的關聯(lián)研究.pdf

1、類風濕關節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一種以關節(jié)滑膜炎為特征的慢性全身性自身免疫性疾病。其發(fā)病機制尚未完全闡明。普遍認為RA是由環(huán)境與基因相互作用以及多基因之間相互作用而導致的一種復雜性疾病。對同卵雙生和異卵雙生的一致性研究表明,RA的遺傳度約為60％,提示遺傳因素在RA發(fā)病中發(fā)揮重要作用。早期遺傳關聯(lián)研究集中于HLA基因,發(fā)現HLA-DRB1與RA的發(fā)病顯著關聯(lián)。但HLA基因只占遺傳因素的三分之一,篩查和鑒定

2、非HLA基因成為近年來的研究熱點。人類基因組計劃的完成以及國際人類基因組單體型圖計劃的不斷完善則為復雜性疾病的易感基因鑒定提供了有利工具。
　　 為在中國漢族人群中篩查鑒定RA易感基因,本研究共收集2274例樣本,包括963例RA患者和1311名健康對照個體,收集抗凝外周血,制備其基因組DNA,采集性別、年齡、民族、發(fā)病時間、抗CCP抗體水平、RF水平、X光片以及活動分期狀況等臨床資料,建立相應數據庫。采用1:1匹配的病例對照關

3、聯(lián)分析方法,對涉及Th1、Th17細胞分化相關基因以及高加索人群RA易感座位的11個基因、36個單核苷酸多態(tài)性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位點進行基因型鑒定,采用卡方檢驗和邏輯回歸等統(tǒng)計分析方法,通過計算P值、比值比(Odds Ratio,OR)、95％可信區(qū)間(95％Confidence Interval,95％CI),檢驗樣本群體代表性,探討不同SNP位點等位基因、基因型和單倍型與RA、R

4、A亞型及其不同臨床表型之間的關聯(lián)性,從而為闡明RA的發(fā)病機制提供線索。
　　 本課題的主要研究結果如下:
　　 1.與Th1分化相關的STAT4基因內一個單倍型(由rs11889341,rs7574865,rs8179673和rs10181656組成)在中國漢族人群中僅與RF的出現顯著關聯(lián)。
　　 與Th1分化相關的STAT4基因內存在一個高加索人群的RA易感單倍型(由rs11889341,rs7574865,r

5、s8179673和rs10181656組成)。本研究發(fā)現,該單倍型在中國漢族人群中與RA、RF+RA、RF-RA、anti-CCP+RA、anti-CCP-RA均無顯著關聯(lián),僅與RF的出現顯著關聯(lián)。標簽位點rs11889341少數等位基因T在RF-RA組中的頻率顯著高于RF+RA組(P=0.024,OR=0.73,95％CI:0.56-0.95),純合突變型TT在RF-RA組中的頻率顯著高于RF+RA組(P=0.013,OR=0.49,

6、95％CI:0.28-0.86)。
　　 2.與Th17分化相關的IL-23R基因內的標簽位點均與anti-CCP+RA易感性顯著關聯(lián),且這些檢測位點的突變型等位基因均是anti-CCP+RA的遺傳危險因子。
　　 等位基因分析結果顯示IL-23R基因內rs1569922、rs7539625、rs11465817、rs10889677的少數等位基因(突變型)均與anti-CCP+RA易感性顯著相關(P＜0.05),且均呈

7、現為不同程度的風險效應。Rs1569922的突變型等位基因T的攜帶者患anti-CCP+RA的風險是野生型C的1.23倍(P=0.01,OR=1.23,95％CI:1.05-1.44)。Rs7539625突變型等位基因G的攜帶者患病風險是野生型A的1.16倍(P=0.05,OR=1.16,95％CI:1.00-1.36)。Rs11465817突變型等位基因C的攜帶者患病風險是野生型A的1.17倍(P=0.045,OR=1.17,95％C

8、I:1.00-1.36)。Rs10889677突變型等位基因C的攜帶者患病風險是野生型A的1.26倍(P=0.01,OR=1.26,95％CI:1.06-1.49)。
　　 基因型分析的結果顯示,rs1569922位點在顯性遺傳模式下突變等位基因T的攜帶者患anti-CCP+RA的風險是野生純合型的1.32倍(P=0.017,OR=1.32,95％CI:1.05-1.65)。Rs7539625位點突變純合型的攜帶者患病風險是野生

9、純合型的1.36倍(P=0.05,OR=1.36,95％CI:1.00-1.84)。Rs11465817位點在顯性遺傳模式下,突變等位基因C的攜帶者患病風險是野生純合型的1.29倍(P=0.032,OR=1.29,95％CI:1.02-1.63)。Rs10889677的雜合基因型CA與anti-CCP+RA易感性顯著相關(P=0.0005,OR=1.49,95％CI:1.19-1.87)。而IL-12Rβ2基因內rs1495964位點的

10、雜合型CT與anti-CCP+RA易感性顯著相關(P=0.005),顯示出對anti-CCP+RA發(fā)病的保護效應(OR=0.71,95％CI:0.56-0.90)。
　　 3.與Th1分化相關的IL-12Rβ2基因內的標簽位點均與anti-CCP-RA顯著關聯(lián),其中rs11209050的突變型等位基因是anti-CCPRA的遺傳危險因子。與IL-12Rβ2基因緊密連鎖的SERBP1基因也與anti-CCP-RA顯著關聯(lián)。

11、　　 綜合IL-23R、IL-12Rβ2基因與RA及各亞型易感性的關聯(lián)分析結果,可以看到一個有意思的現象:IL-23R基因內所檢測的標簽位點(rs1569922、rs7539625、rs11465817、rs10889677)都與anti-CCP+RA顯著關聯(lián),且突變型等位基因均為anti-CCP+RA的遺傳危險因子。而IL-12Rβ2內所檢測的標簽位點(rs11209050和rs1495964)則只與anti-CCP-RA顯著關聯(lián)。

12、提示RA各亞型的易感基因有所不同,各亞型發(fā)病的機制也可能存在差異。該結果支持目前新提出的一個觀點,即RA是一種異質性疾病,至少存在兩個不同的亞型,anti-CCP+RA和anti-CCP-RA,可能具有不同的發(fā)病機制。鑒于IL-23與Th17細胞上IL-23R的結合是Th17細胞擴展和維持所必需,本研究顯示IL-23R基因多態(tài)性與anti-CCP+RA的發(fā)病顯著關聯(lián),推測Th17可能在anti-CCP+RA發(fā)病機制中發(fā)揮了一定的作用。鑒

13、于IL-12Rβ2只表達于活化的Th1細胞上,不表達于Th2細胞,本研究結果顯示IL-12Rβ2多態(tài)性與anti-CCP-RA易感性顯著關聯(lián),推測Th1細胞可能與anti-CCP-RA的發(fā)病機制相關。該結果對當前RA發(fā)病機制中Th1與Th17相互關系以及孰重孰輕的爭論提供了新的線索和提示:Th1和Th17在RA發(fā)病機制中的作用應該分亞型來考慮,Th1與Th17在RA不同亞型的發(fā)病機制中主導作用可能不同。
　　 4.位于HLA-D