免疫基因多態(tài)性與漢族人群類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎遺傳易感性的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎為特征的慢性全身性自身免疫性疾病。其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。普遍認(rèn)為RA是由環(huán)境與基因相互作用以及多基因之間相互作用而導(dǎo)致的一種復(fù)雜性疾病。對同卵雙生和異卵雙生的一致性研究表明,RA的遺傳度約為60％,提示遺傳因素在RA發(fā)病中發(fā)揮重要作用。早期遺傳關(guān)聯(lián)研究集中于HLA基因,發(fā)現(xiàn)HLA-DRB1與RA的發(fā)病顯著關(guān)聯(lián)。但HLA基因只占遺傳因素的三分之一,篩查和鑒定

2、非HLA基因成為近年來的研究熱點(diǎn)。人類基因組計(jì)劃的完成以及國際人類基因組單體型圖計(jì)劃的不斷完善則為復(fù)雜性疾病的易感基因鑒定提供了有利工具。
　　 為在中國漢族人群中篩查鑒定RA易感基因,本研究共收集2274例樣本,包括963例RA患者和1311名健康對照個(gè)體,收集抗凝外周血,制備其基因組DNA,采集性別、年齡、民族、發(fā)病時(shí)間、抗CCP抗體水平、RF水平、X光片以及活動(dòng)分期狀況等臨床資料,建立相應(yīng)數(shù)據(jù)庫。采用1:1匹配的病例對照關(guān)

3、聯(lián)分析方法,對涉及Th1、Th17細(xì)胞分化相關(guān)基因以及高加索人群RA易感座位的11個(gè)基因、36個(gè)單核苷酸多態(tài)性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位點(diǎn)進(jìn)行基因型鑒定,采用卡方檢驗(yàn)和邏輯回歸等統(tǒng)計(jì)分析方法,通過計(jì)算P值、比值比(Odds Ratio,OR)、95％可信區(qū)間(95％Confidence Interval,95％CI),檢驗(yàn)樣本群體代表性,探討不同SNP位點(diǎn)等位基因、基因型和單倍型與RA、R

4、A亞型及其不同臨床表型之間的關(guān)聯(lián)性,從而為闡明RA的發(fā)病機(jī)制提供線索。
　　 本課題的主要研究結(jié)果如下:
　　 1.與Th1分化相關(guān)的STAT4基因內(nèi)一個(gè)單倍型(由rs11889341,rs7574865,rs8179673和rs10181656組成)在中國漢族人群中僅與RF的出現(xiàn)顯著關(guān)聯(lián)。
　　 與Th1分化相關(guān)的STAT4基因內(nèi)存在一個(gè)高加索人群的RA易感單倍型(由rs11889341,rs7574865,r

5、s8179673和rs10181656組成)。本研究發(fā)現(xiàn),該單倍型在中國漢族人群中與RA、RF+RA、RF-RA、anti-CCP+RA、anti-CCP-RA均無顯著關(guān)聯(lián),僅與RF的出現(xiàn)顯著關(guān)聯(lián)。標(biāo)簽位點(diǎn)rs11889341少數(shù)等位基因T在RF-RA組中的頻率顯著高于RF+RA組(P=0.024,OR=0.73,95％CI:0.56-0.95),純合突變型TT在RF-RA組中的頻率顯著高于RF+RA組(P=0.013,OR=0.49,

6、95％CI:0.28-0.86)。
　　 2.與Th17分化相關(guān)的IL-23R基因內(nèi)的標(biāo)簽位點(diǎn)均與anti-CCP+RA易感性顯著關(guān)聯(lián),且這些檢測位點(diǎn)的突變型等位基因均是anti-CCP+RA的遺傳危險(xiǎn)因子。
　　 等位基因分析結(jié)果顯示IL-23R基因內(nèi)rs1569922、rs7539625、rs11465817、rs10889677的少數(shù)等位基因(突變型)均與anti-CCP+RA易感性顯著相關(guān)(P＜0.05),且均呈

7、現(xiàn)為不同程度的風(fēng)險(xiǎn)效應(yīng)。Rs1569922的突變型等位基因T的攜帶者患anti-CCP+RA的風(fēng)險(xiǎn)是野生型C的1.23倍(P=0.01,OR=1.23,95％CI:1.05-1.44)。Rs7539625突變型等位基因G的攜帶者患病風(fēng)險(xiǎn)是野生型A的1.16倍(P=0.05,OR=1.16,95％CI:1.00-1.36)。Rs11465817突變型等位基因C的攜帶者患病風(fēng)險(xiǎn)是野生型A的1.17倍(P=0.045,OR=1.17,95％C

8、I:1.00-1.36)。Rs10889677突變型等位基因C的攜帶者患病風(fēng)險(xiǎn)是野生型A的1.26倍(P=0.01,OR=1.26,95％CI:1.06-1.49)。
　　 基因型分析的結(jié)果顯示,rs1569922位點(diǎn)在顯性遺傳模式下突變等位基因T的攜帶者患anti-CCP+RA的風(fēng)險(xiǎn)是野生純合型的1.32倍(P=0.017,OR=1.32,95％CI:1.05-1.65)。Rs7539625位點(diǎn)突變純合型的攜帶者患病風(fēng)險(xiǎn)是野生

9、純合型的1.36倍(P=0.05,OR=1.36,95％CI:1.00-1.84)。Rs11465817位點(diǎn)在顯性遺傳模式下,突變等位基因C的攜帶者患病風(fēng)險(xiǎn)是野生純合型的1.29倍(P=0.032,OR=1.29,95％CI:1.02-1.63)。Rs10889677的雜合基因型CA與anti-CCP+RA易感性顯著相關(guān)(P=0.0005,OR=1.49,95％CI:1.19-1.87)。而IL-12Rβ2基因內(nèi)rs1495964位點(diǎn)的

10、雜合型CT與anti-CCP+RA易感性顯著相關(guān)(P=0.005),顯示出對anti-CCP+RA發(fā)病的保護(hù)效應(yīng)(OR=0.71,95％CI:0.56-0.90)。
　　 3.與Th1分化相關(guān)的IL-12Rβ2基因內(nèi)的標(biāo)簽位點(diǎn)均與anti-CCP-RA顯著關(guān)聯(lián),其中rs11209050的突變型等位基因是anti-CCPRA的遺傳危險(xiǎn)因子。與IL-12Rβ2基因緊密連鎖的SERBP1基因也與anti-CCP-RA顯著關(guān)聯(lián)。

11、　　 綜合IL-23R、IL-12Rβ2基因與RA及各亞型易感性的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果,可以看到一個(gè)有意思的現(xiàn)象:IL-23R基因內(nèi)所檢測的標(biāo)簽位點(diǎn)(rs1569922、rs7539625、rs11465817、rs10889677)都與anti-CCP+RA顯著關(guān)聯(lián),且突變型等位基因均為anti-CCP+RA的遺傳危險(xiǎn)因子。而IL-12Rβ2內(nèi)所檢測的標(biāo)簽位點(diǎn)(rs11209050和rs1495964)則只與anti-CCP-RA顯著關(guān)聯(lián)。

12、提示RA各亞型的易感基因有所不同,各亞型發(fā)病的機(jī)制也可能存在差異。該結(jié)果支持目前新提出的一個(gè)觀點(diǎn),即RA是一種異質(zhì)性疾病,至少存在兩個(gè)不同的亞型,anti-CCP+RA和anti-CCP-RA,可能具有不同的發(fā)病機(jī)制。鑒于IL-23與Th17細(xì)胞上IL-23R的結(jié)合是Th17細(xì)胞擴(kuò)展和維持所必需,本研究顯示IL-23R基因多態(tài)性與anti-CCP+RA的發(fā)病顯著關(guān)聯(lián),推測Th17可能在anti-CCP+RA發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮了一定的作用。鑒

13、于IL-12Rβ2只表達(dá)于活化的Th1細(xì)胞上,不表達(dá)于Th2細(xì)胞,本研究結(jié)果顯示IL-12Rβ2多態(tài)性與anti-CCP-RA易感性顯著關(guān)聯(lián),推測Th1細(xì)胞可能與anti-CCP-RA的發(fā)病機(jī)制相關(guān)。該結(jié)果對當(dāng)前RA發(fā)病機(jī)制中Th1與Th17相互關(guān)系以及孰重孰輕的爭論提供了新的線索和提示:Th1和Th17在RA發(fā)病機(jī)制中的作用應(yīng)該分亞型來考慮,Th1與Th17在RA不同亞型的發(fā)病機(jī)制中主導(dǎo)作用可能不同。
　　 4.位于HLA-D