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文檔簡介
1、本文對MBD1/mdr1信號轉錄調控胰腺癌多藥耐藥性及其臨床意義進行了探討。本研究利用RNA干擾技術,設計合成了針對MBDl基因的siRRAs,成功構建MBDlsiRNAs真核表達質粒RotroSuper-MBDl$iRNAs,并成功載入質粒.采用脂質體介導的方法將MBDl$iRNAs表達質粒轉染胰腺癌細胞系BxPC-3,成功下調了BxPC-3細胞株MBD1基因表達水平。應用免疫組化定量分析法、FQ-PCR技術、MSP方法及MTT比色法
2、檢測BxPC-3細胞在調控前后mdr1/P-gP在蛋白水平、基因表達水平、基因甲基化程度以及腫瘤細胞增殖能力變化。結果表明:胰腺癌中P-gp與mdr1 mKNA表達呈顯著一致,與mdr1基因轉錄區(qū)域結合位點甲基化表達程度也呈顯著相關;當胰腺癌細胞株BxPC-3通過脂質體介導方法轉染MBDlsiRNAs表達質粒后,M BD1的表達受到有效抑制,改變了mdr1/P-gP在蛋白水平、mRNA水平和基因甲基化的表達,影響了腫瘤細胞對藥物的耐藥能
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