DLC-1基因兩個轉錄本在膠質瘤中的表達研究.pdf

1、膠質瘤是中樞神經系統(tǒng)腫瘤中最常見的原發(fā)惡性腫瘤，約占顱內腫瘤的44％。由于膠質瘤呈浸潤性生長，因而手術過程中很難確切判定腫瘤邊界。這樣一方面使病人殘、死的幾率因手術區(qū)域無謂的擴大而大大增加；另一方面，即使腫瘤組織在顯微鏡下全部切除，仍約殘余104～105個的具有較強的增殖能力的腫瘤細胞，成為膠質瘤復發(fā)的基礎。現(xiàn)有的抗腫瘤藥物因血腦屏障、對正常腦組織不可逆的毒副作用等亦收效甚微。統(tǒng)計表明惡性膠質母細胞瘤綜合治療后的平均生存期不足12個月，

2、2年生存率僅為10％，因此，膠質瘤的治療目前仍是世界公認的難題。 造成膠質瘤難于防治的根本原因在于其病因不明確。研究表明，基因的異常表達是膠質瘤的發(fā)生發(fā)展的本質原因，而且是一個涉及多種基因、多階段的復雜過程，包括癌基因的激活和抑癌基因失活。PTEN、TFPI-2、RASSF1A和BLM等基因的缺失或突變已被證實在膠質瘤中起重要作用，表達p53、Rb等抑癌基因能有效誘導腦癌細胞凋亡或者抑制其增殖。因而，揭示膠質瘤的分子遺傳機制對于

3、闡明膠質瘤的發(fā)病原因具有重要的意義，目前也是膠質瘤病因研究領域的熱點。 DLC-1基因位于8號染色體短臂上，編碼蛋白為RhoGAPs。DLC-1表達下調，會使Rho因子持續(xù)激活，進而引起細胞惡性增殖，長成腫瘤。近期研究顯示DLC-1能有效抑制肝癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胃癌和血液惡性腫瘤等腫瘤生長。此外，DLC-1基因還具有抑制腫瘤細胞侵襲和轉移的作用。由此可見，DLC-1是一個新的重要的抑癌基因。 但是，DLC-1

4、基因在膠質瘤組織中的表達如何，是否也是膠質瘤的一種抑癌基因，目前尚未見報道。本課題著重研究DLC-1基因不同轉錄本在膠質瘤中的表達，旨在為進一步揭示DLC-1基因在膠質瘤發(fā)病中的遺傳學機制提供理論依據。 研究目的:研究DLC-1基因兩個轉錄本在膠質瘤組織中的表達。 研究方法:以廣州醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院神經外科2007年6月1日到2008年2月日收治的49例膠質瘤患者作為研究對象，并選取10例顱腦損傷患者行內減壓手術時的腦組

5、織標本為對照組，根據DLC-1基因第二轉錄本及第一轉錄本mRNA序列設計上下游引物，抽提組織中的總RNA，實時熒光定量PCR檢測膠質瘤組織和對照組腦組織中DLC-1基因第二轉錄的mRNA表達水平；RT-PCR擴增，檢測第一轉錄本在膠質瘤組織和對照組腦組織的表達情況。 研究結果: 1.實時熒光定量PCR結果表明，膠質瘤中的DLC-1基因第二轉錄mRNA高表達，而在對照組腦組織中DLC-1基因第二轉錄mRNA低表達；其中，4

6、6份（93％）膠質瘤組織中DLC-1基因第二轉錄本mRNA表達量高于對照組腦組織。 2.將膠質瘤樣本進行WHO病理分級，Ⅰ級膠質瘤組織中DLC-1基因第二轉錄本mRNA水平顯著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ級樣本中水平。 3.7例對照組腦組織中均有表達DLC-1基因第一轉錄本，而在15例膠質瘤組織中有13例DLC-1基因第一轉錄本表達水平顯著降低，對照組腦組織中DLC-1基因第一轉錄本mRNA轉錄水平是膠質瘤組織的2-3倍。 結