大鼠急性脊髓損傷后肺水腫的機(jī)制及黃芪多糖對(duì)肺水腫的保護(hù)作用的初步研究.pdf

1、觀察大鼠急性脊髓損傷后不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)肺組織的水腫情況及病理改變，探討P物質(zhì)及CD44含量的改變與肺水腫的關(guān)系。并探索中藥黃芪對(duì)肺水腫的抑制作用，及對(duì)P物質(zhì)和CD44的影響。實(shí)驗(yàn)采用C7段脊髓的大鼠Allen's打擊模型，打擊力度為10×2.5g·cm，造成大鼠脊髓損傷。觀察肺組織的病理改變和濕干重比。測定血清和肺泡灌洗液中P物質(zhì)及CD44含量和蛋白濃度，計(jì)算肺通透指數(shù)。并設(shè)置對(duì)照組，觀察不同濃度黃芪對(duì)大鼠脊髓損傷后肺組織的病理改變和肺濕干

2、重比的影響，以及黃芪對(duì)P物質(zhì)和CD44的影響。研究發(fā)現(xiàn)，大鼠急性脊髓損傷后肺部出現(xiàn)出血和水腫，傷后3d最為嚴(yán)重，傷后1周開始減輕。肺泡灌沈液及血清中P物質(zhì)含量的變化與肺水腫輕重程度成正相關(guān)，血清CD44含量變化與肺水腫輕重程度呈負(fù)相關(guān)性。而不同濃度黃芪對(duì)急性脊髓損傷后大鼠肺水腫及血清和肺泡灌洗液P物質(zhì)和CD44含量有影響。大鼠急性脊髓損傷后交感神經(jīng)可能過度興奮，刺激P物質(zhì)的大量釋放，參與急性脊髓損傷后肺水腫的形成過程。而肺損傷后肺泡上皮

3、細(xì)胞受損，故肺泡細(xì)胞CD44表達(dá)下降，從而減弱對(duì)肺泡損傷修復(fù)能力及對(duì)炎癥反應(yīng)的控制。而黃芪多糖可有效減輕大鼠急性脊髓損傷后肺水腫的程度。
　　 背景:
　　 臨床上，急性脊髓損傷(Spinal cord injury，SCI)后肺部并發(fā)癥是造成患者早期死亡的主要原因。其中最常見的并發(fā)癥為呼吸功能障礙、肺炎等。高位頸髓損傷的患者，由于呼吸機(jī)能減退，咳嗽和清除分泌物的能力下降，體位導(dǎo)致的排痰不暢，肺栓塞等造成肺部感染和呼吸衰

4、竭，但對(duì)于低位頸髓甚至下胸段SCI，這一觀點(diǎn)顯然是不充分的。因此可能存在某種更為重要的因素造成SCI后發(fā)生早期呼吸功能衰竭和肺部感染。神經(jīng)源性肺水腫(Neurogenic pulmonary edema，NPE)是SCI后一種緊急而且威脅生命的嚴(yán)重并發(fā)癥，它的病理特征是肺血管充血，富含蛋白的水腫液滲出和肺泡內(nèi)出血。目前認(rèn)為NPE發(fā)病機(jī)制可能是由于SCI后血管活性物質(zhì)的釋放和交感神經(jīng)過度興奮，導(dǎo)致肺靜脈收縮，肺毛細(xì)血管靜水壓升高，肺泡壁受

5、損，肺毛細(xì)血管通透性增高，液體進(jìn)入肺泡內(nèi)形成肺水腫。
　　 急性脊髓損傷是脊柱外科一種常見的疾病，如何明確SCI早期肺部并發(fā)癥的致病機(jī)理，更好的預(yù)防和處理SCI早期肺部并發(fā)癥，一直是困擾脊柱外科醫(yī)生和神經(jīng)外科醫(yī)生的難題，也是脊柱外科和神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)之一。有研究發(fā)現(xiàn)，P物質(zhì)可促進(jìn)肥大細(xì)胞脫顆粒釋放組胺、激肽、趨化因子、前列腺素、白三烯、IL-1、IFN-γ等大量炎癥介質(zhì)，可促進(jìn)單核細(xì)胞分泌IL-1、IL-6、TNF-

6、α等炎癥因子，可延緩中性粒細(xì)胞凋亡，促進(jìn)中性粒細(xì)胞粘附和移行，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生粘附分子，進(jìn)一步加重組織炎癥反應(yīng)。同時(shí)，也有研究表明急性SCI后患者的細(xì)胞免疫功能受到抑制，可引起機(jī)體非特異及特異性免疫功能障礙。而在特異性免疫中尤以細(xì)胞免疫功能受損為重，主要是T細(xì)胞的功能及自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)的功能等受到抑制。較早研究證實(shí)黃芪作為一種傳統(tǒng)的中藥具有免疫增強(qiáng)作用，可明顯升高實(shí)驗(yàn)組大鼠外周血T淋巴細(xì)胞CD4值。從而提高機(jī)體特異性細(xì)胞免疫功能

7、。而CD44通過肺泡Ⅱ型細(xì)胞與周圍間質(zhì)和細(xì)胞連接，從而參與對(duì)肺泡損傷修復(fù)及炎癥反應(yīng)。因此本課題擬觀察大鼠急性SCI后不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)肺組織的病理改變及引起這一改變的機(jī)制以及黃芪多糖對(duì)SCI后肺水腫的保護(hù)作用。
　　 目的:
　　 1.探討大鼠急性脊髓損傷后不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)肺組織的病理改變。
　　 2.探討大鼠急性脊髓損傷后血清和肺泡灌沈液中P物質(zhì)及CD44含量的改變與神經(jīng)源性肺水腫的關(guān)系，觀察黃芪多糖對(duì)肺水腫的保護(hù)作用。

8、
　　 方法
　　 1.采用C7段脊髓改良Allen's打擊法制作大鼠SCI模型，打擊力度為10×2.5g·cm
　　 2.將大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。于術(shù)后第1天、第3天、1周、2周時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，取肺組織，稱濕重、干重，計(jì)算濕干重之比；通過大體解剖和光學(xué)顯微鏡觀察肺組織的病理學(xué)變化。
　　 3.將大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。于術(shù)后第1天、第3天、1周、2周時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，檢測各組大鼠血清和肺泡灌洗液

9、中P物質(zhì)和CD44含量以及蛋白濃度，計(jì)算肺通透指數(shù)。
　　 4.將大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、生理鹽水注射組、低濃度黃芪注射組、高濃度黃芪注射組和假手術(shù)組。于術(shù)后第1天、第3天、1周、2周時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，取肺組織，稱濕重、干重，計(jì)算濕干重之比；通過大體解剖和光學(xué)顯微鏡觀察肺組織的病理學(xué)變化。比較不同組間肺濕干重之比和肺組織的病理學(xué)變化的差別
　　 5.將大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、生理鹽水注射組、低濃度黃芪注射組、高濃度黃芪注射

10、組和假手術(shù)組。于術(shù)后第1天、第3天、1周、2周時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，檢測各組大鼠血清和肺泡灌洗液中P物質(zhì)和CD44含量以及蛋白濃度，計(jì)算肺通透指數(shù)。比較不同組間P物質(zhì)、CD44含量及肺通透指數(shù)的差別。
　　 結(jié)論:
　　 1.大鼠急性脊髓損傷后早期出現(xiàn)肺組織充血、出血、和肺水腫，這可能是早期呼吸功能衰竭和肺部感染的病理基礎(chǔ)。
　　 2.大鼠脊髓損傷后P物質(zhì)的大量釋放可能參與急性脊髓損傷后肺水腫的形成過程，而CD44可能