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文檔簡介
1、目的:
低氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1α)是介導(dǎo)細(xì)胞低氧反應(yīng)最關(guān)鍵的核轉(zhuǎn)錄因子,且與細(xì)胞存活、增殖及耐受性密切相關(guān)。研究表明吉非替尼能夠下調(diào)HIF-1α的表達(dá)而逆轉(zhuǎn)低氧引起的藥物耐受。本文旨在對(duì)HIF-1α與吉非替尼耐藥存在相關(guān)性進(jìn)行初步研究。
方法:
體外培養(yǎng)肺腺癌A549細(xì)胞和吉非替尼耐藥株A549/I細(xì)胞。將細(xì)胞分成4組:a組:正常氧分壓
2、下培養(yǎng)的A549細(xì)胞;b組:正常氧分壓下培養(yǎng)耐藥株A549/I細(xì)胞;c組:低氧條件下(2.0%O2)的A549細(xì)胞;d組:低氧條件下(2.0%O2)耐藥株A549/I細(xì)胞。4組均培養(yǎng)24h后,采用RT-PCR和Western blot方法分別檢測(cè)各組HIF-1αmRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。
結(jié)果:
(1)RT-PCR的結(jié)果顯示:B組HIF-1αmRNA的表達(dá)(0.54±0.07)和A組(0.48±0.08)相
3、比,P>0.05,兩者差異沒有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;C組(0.72±0.04)和D(0.94±0.09)相比,P>0.05,兩者差異沒有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明在常氧和低氧的情況下HIF-1αmRNA的表達(dá)均沒有顯著差異。
(2)Western blot的結(jié)果顯示B組HIF-1α蛋白的表達(dá)(0.54±0.07)明顯高于A組;C組(0.72±0.04)和D(0.94±0.09)相比,P<0.05,兩者差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明同
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