缺血預適應通過Beclin 1與Bcl-2調(diào)控自噬對大鼠心肌缺血-再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的：觀察缺血預適應對在體大鼠急性心肌缺血再灌注損傷的保護作用及與自噬蛋白Beclin1與抗凋亡蛋白Bcl-2的可能關(guān)聯(lián),從而為缺血性心臟病的治療提供新思路。
　　方法：雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠24只,重量200g-250g,隨機平均分為假手術(shù)(Sham)組、缺血/再灌注(Ischemia-reperfusion,I/R)組、缺血預適應(IschemicPreconditioning,IPC)組。IPC組在缺血

2、再灌注前給予短暫缺血5分鐘、再灌注5分鐘并循環(huán)3次,隨后結(jié)扎30分鐘,再灌120分鐘。應用電子顯微鏡觀察心肌細胞自噬泡的發(fā)生,線粒體的形態(tài)學改變;Western blotting測定LC3-II和Beclin1蛋白的表達;免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)檢測Beclin1和Bcl-2蛋白的結(jié)合情況;TUNEL法檢測細胞凋亡。
　　結(jié)果：與I/R組相比,IPC組自噬泡數(shù)量增多,線粒體超微結(jié)構(gòu)損傷

3、減輕。LC3-II作為評價自噬強度的指標,IPC與I/R組相比,該值上調(diào)(P<0.05)。I/R組與S組、IPC組相比,Beclin 1與Bcl-2蛋白結(jié)合程度明顯降低(P<0.01);而這兩組之間差異無顯著性(P>0.05)。IPC組細胞凋亡率較I/R組明顯降低(P<0.01)。
　　結(jié)論：急性缺血再灌注可誘導心肌細胞自噬的發(fā)生,缺血預適應可通過促進Beclin1與Bcl-2的結(jié)合以減少再灌注階段起損傷心肌作用的Beclin 1