復(fù)方中藥預(yù)防非酒精性脂肪性肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：非酒精性脂肪性肝病的患病率日趨升高，其疾病譜包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纖維化和脂肪性肝硬化。我們?cè)谇捌趯?shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)復(fù)方中藥益腎軟堅(jiān)煎能夠有效的治療脂肪肝和高脂血癥，并改善肝功能。本實(shí)驗(yàn)旨在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，建立非酒精性脂肪性肝纖維化大鼠模型，并繼續(xù)研究復(fù)方中藥軟肝煎對(duì)非酒精性脂肪性肝纖維化的預(yù)防作用及其機(jī)制。 方法：雄性SD大鼠38只，按體重分層隨機(jī)分為4組：正常組8只普通飼料飲食，其余各組分別為模型組14只

2、、低劑量組8只和高劑量組8只，均為高脂飼料飲食。飼養(yǎng)16周后隨機(jī)殺死模型組4只大鼠，確定脂肪肝模型成立且無(wú)異常纖維結(jié)締組織增生后，在原飼養(yǎng)方法基礎(chǔ)上對(duì)低劑量組和高劑量組行中藥灌胃，劑量分別為1.28g生藥/100g體重/日和2.56g生藥/100g體重/日；正常組和模型組以生理鹽水灌胃。治療12周后處死大鼠，稱取體重和肝濕重，取肝臟左葉置于10％福爾馬林中固定，石蠟切片進(jìn)行HE和VanGiesson苦味酸酸性復(fù)紅染色，分別觀察脂肪變性、

3、炎癥和纖維化程度，免疫組化法觀察肝組織中TGF-β1的陽(yáng)性表達(dá)；取血檢測(cè)生化指標(biāo)TP、ALB、ALT、AST、TC，用放射免疫學(xué)方法測(cè)定血清中HA、LN、PCⅢ和CⅣ。 結(jié)果：模型組大鼠體重和肝濕重均明顯高于正常組、低劑量組和高劑量組并有顯著性差異(P＜0.05)，低劑量組體重和肝濕重高于正常組(P＜0.05)，高劑量組與正常組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。肝組織病理學(xué)結(jié)果示：模型組大鼠可見(jiàn)全小葉內(nèi)肝細(xì)胞脂肪變性伴較多炎細(xì)胞

4、浸潤(rùn)及碎屑樣壞死；VG染色示中央靜脈周圍、竇周及匯管區(qū)內(nèi)纖維結(jié)締組織明顯增生，表明非酒精性脂肪性肝纖維化模型復(fù)制成功。兩預(yù)防組大鼠肝組織脂肪變性、炎細(xì)胞浸潤(rùn)、壞死及纖維結(jié)締組織的增生均較模型組明顯減輕，尤以高劑量組更為顯著。血清學(xué)指標(biāo)結(jié)果示：與正常組比較，模型組大鼠ALT、AST、TC、HA、LN、PCⅢ、CⅣ均明顯增高并有顯著性差異(P＜0.05)；與模型組比較，低劑量組和高劑量組均明顯降低有顯著性差異(P＜0.05)，其中高劑量組指

5、標(biāo)略低于低劑量組但無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。相關(guān)性分析示血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ與肝組織纖維化程度之間均存在正相關(guān)。肝組織TGF-β1的免疫組化測(cè)定結(jié)果：與正常組相比，模型組TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)增高并有顯著性差異(P＜0.05)，兩預(yù)防組與正常組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。與模型組比較，高劑量組陽(yáng)性表達(dá)程度降低有顯著性差異(P＜0.05)，而低劑量組無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 結(jié)論： 我們成功復(fù)制了大鼠非酒精性