復(fù)方牛胎肝提取物治療大鼠非酒精性脂肪性肝病的研究.pdf

1、目的： 非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholicfattyliverdisease，NAFLD)是指無過量飲酒史的以肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞脂肪變性和脂肪貯積為病理特征的臨床病理綜合征．近年來NAFLD的發(fā)病率不斷攀高，且起病漸趨低齡化，已成為全球性的公共衛(wèi)生問題。NAFLD本身會(huì)向肝纖維化、肝硬化甚至是肝癌進(jìn)展，導(dǎo)致嚴(yán)重的不良后果；脂變肝臟還可加速慢性丙型病毒性肝炎等其他肝病向終末期肝病進(jìn)展。更嚴(yán)峻的是，NAFLD還與2型糖尿病、代謝綜

2、合征及其相關(guān)心腦血管事件密切相關(guān)，對人類健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅．NAFLD的治療目前缺乏特效藥物，目前主要根據(jù)患者的具體病情進(jìn)行個(gè)體化治療．基礎(chǔ)治療包括控制飲食、控制體重、增加運(yùn)動(dòng)、修正不良行為、控制原發(fā)基礎(chǔ)疾病等；藥物干預(yù)包括改善胰島素抵抗藥物、調(diào)脂藥、抗氧化劑、熊去氧膽酸及其他對癥處理。復(fù)方牛胎肝提取物主要成分包括牛胎肝提取物、肌醇維生素、B12等，對機(jī)體糖脂代謝中有一定的調(diào)節(jié)作用，但其對NAFLD的影響尚不明確．本研究運(yùn)用高脂飲食建立N

3、AFLD大鼠模型，予以復(fù)方牛胎肝提取物治療，觀察其對NAFLD的作用及其可能相關(guān)作用機(jī)制，為復(fù)方牛胎肝提取物治療NAFLD提供理論依據(jù)． 材料與方法： 1．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來源：55只雄性清潔級SD大鼠，體重150-160g，由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供． 2．動(dòng)物模型的建立：所有SD大鼠按照體重隨機(jī)分為對照組、模型組和大中小劑量治療組．對照組予以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，8周后加用生理鹽水灌胃；高脂模型組和大中小劑量治療組予以高脂飼料

4、喂養(yǎng)，8周后分別加用生理鹽水灌胃，和大中小劑量(40、24、15mg/kg/d)復(fù)方牛胎肝提取物灌胃．所有大鼠均于第16周末處死，以觀察復(fù)方牛胎肝提取物治療效果。 3．肝臟組織學(xué)檢查：在肝臟最大葉距邊緣5mm處取小塊肝組織，浸泡于福爾馬林液中固定，石蠟包埋，切片，HE染色，光鏡下觀察各組大鼠肝臟組織病理學(xué)改變，以評價(jià)復(fù)方牛胎肝提取物對NAFLD大鼠的治療效果． 4．主要觀察指標(biāo)：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，尾靜脈采血，測定血清天門冬酸氨

5、基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、總膽汁酸、堿性磷酸酶、膽堿脂酶、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、極低密度脂蛋白、血糖和瘦素等．其中各血清生化指標(biāo)采用酶法于日立7600全自動(dòng)生化儀上測定，血清瘦素采用放射免疫法測定． 結(jié)果： 1．肝臟組織病理學(xué)檢查：16周時(shí)，對照組大鼠肝臟無異常發(fā)現(xiàn)；模型組大鼠肝臟體積明顯增大、包膜緊張、呈土黃色、切面油膩，光鏡下觀察到明顯的脂肪變性和匯管區(qū)大量的炎癥細(xì)胞浸潤，符合NASH的病

6、理表現(xiàn)；復(fù)方牛胎肝提取物治療組大鼠肝臟組織病理學(xué)改變介于對照組和模型組之間，也存在肝細(xì)胞炎癥細(xì)胞浸潤和脂肪變性，但炎癥細(xì)胞浸潤程度和脂肪變性程度較模型組輕．大中劑量治療組之間肝臟組織病理學(xué)差異較小，小劑量治療組病變程度相對較嚴(yán)重． 2．大鼠體重、肝臟指數(shù)和肝臟濕重變化：入選分組時(shí)各組大鼠體重?zé)o明顯差別．造模16周時(shí)，模型組和各治療組肝臟指數(shù)和肝臟濕重指標(biāo)均較對照組顯著增加(P＜0.01)；與模型組相比，大劑量治療組體重明顯下降(

7、P＜0.05)，大中小劑量治療組肝濕重均明顯減輕(P＜0.05)，大中劑量治療組肝指數(shù)明顯下降(P＜0.05)． 3．血清生化檢測：造模16周時(shí)，與對照組相比，模型組天門冬酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、總膽汁酸，堿性磷酸酶等均顯著升高(P＜0.05)；與模型組相比，大中小劑量牛胎肝治療組血清空腹血糖均有不同程度降低(P＜0.05)． 4．血清瘦素檢測：造模16周時(shí)，模型組血清瘦素水平與對照組相比顯著升高(P＜0.05)