草蓯蓉乙醇提取物對(duì)大鼠非酒精性脂肪性肝病的保護(hù)作用及機(jī)制的初步探討.pdf

1、非酒精性脂肪性肝?。╪on-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）為代謝綜合癥的重要組分之一，其在肥胖、高脂血癥和2型糖尿病人群中有著相當(dāng)高的發(fā)病率，已成為全球普遍關(guān)注的醫(yī)學(xué)問題和社會(huì)問題。目前，NAFLD的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，缺乏有效的治療藥物。草蓯蓉（boschniakia rossica Fedtsch et Flerov，BR）具有調(diào)節(jié)免疫、抗脂質(zhì)過氧化及清除自由基、抗炎及抗腫瘤作用、增強(qiáng)受損

2、傷的肝枯否細(xì)胞免疫活性等作用。BR對(duì)NAFLD有無(wú)保護(hù)作用尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過建立實(shí)驗(yàn)大鼠NAFLD模型，初步探討了草蓯蓉乙醇提取物（Boschniakia rossica ethanol extract,BREE）對(duì)NAFLD的保護(hù)作用及部分機(jī)制。
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)分組：50只清潔級(jí)SD大鼠（體重：180±20 g）隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)藥物高、中、低劑量組。正常對(duì)照組以普通飼料喂養(yǎng)，其余4組均

3、以改良氨基酸及膽堿缺乏（CDAA）的飼料喂養(yǎng)，共計(jì)8周。實(shí)驗(yàn)第2周始，實(shí)驗(yàn)藥物高、中、低劑量組分別按大鼠體重每日給予500mg/kg、250mg/kg、125 mg/kg BREE，以5ml生理鹽水溶解后灌胃，模型組與正常組給予等量生理鹽水灌胃。第8周末，所有實(shí)驗(yàn)大鼠禁食水12h后，水合氯醛麻醉下，經(jīng)門靜脈抽血5ml，常規(guī)制備血清；取出肝臟并稱重；留取肝臟左葉組織2塊，分別制備免疫組化和病理組織標(biāo)本。
　　2.檢測(cè)指標(biāo)：采用全自動(dòng)

4、生化分析儀檢測(cè)血清ALT、AST、TBA值；ELISA法測(cè)定血清TNF-α值；免疫組化染色觀察CYP2E1、α-SMA、TGF-β1及 TIMP-1的表達(dá)；HE染色觀察肝組織病理變化。
　　3.統(tǒng)計(jì)分析：檢測(cè)結(jié)果以（X±s)表示，用SPSS10.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，各組間比較用t檢驗(yàn)，多組間比較用方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1. BREE對(duì)SD大鼠NAFLD的保護(hù)作用
　　高劑量B

5、REE組血清ALT、AST、TBA的水平（41.31±12.32 U/L、42.12±6.32 U/L、68.20±32.62μmmol/L）顯著低于模型組（67.92±1.28 U/L、74.12±5.20 U/L、129.56±23.12μmmol/L）,具有顯著性差異，(P<0.01)。
　　2. BREE對(duì)SD大鼠NAFLD肝組織CYP2E1表達(dá)的影響
　　高劑量BREE組肝組織CYP2E1表達(dá)水平（5.30±2.6

6、2）顯著低于模型組（1.20±0.44），具有顯著性差異，(P<0.01)。
　　3. BREE對(duì)SD大鼠NAFLD血清TNF-α水平的影響
　　高劑量BREE組血清TNF-α水平（70.04±12.62 ng/L）低于模型組（31.20±2.44 ng/L），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(P<0.05)。
　　4. BREE對(duì)SD大鼠NAFLD肝組織中α-SMA、TGF-β1及 TIMP-1表達(dá)的影響
　　肝組織α-SMA

7、、TGF-β1及 TIMP-1在模型組均呈陽(yáng)性表達(dá),BREE組及正常組均呈陰性表達(dá)。
　　5. BREE對(duì)SD大鼠NAFLD病理組織學(xué)的影響
　　模型組肝組織呈重度脂肪變性及壞死，匯管區(qū)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，未見纖維間隔形成；而不同劑量BREE組的肝細(xì)胞變性、壞死及炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)呈不同程度的改善。
　　結(jié)論：
　　本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，BREE對(duì)改良CDAA誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)SD大鼠NAFLD有明顯的保護(hù)作用。其機(jī)制可能與下調(diào)肝組