非酒精性脂肪性肝病的應(yīng)用基礎(chǔ)研究.pdf

1、研究背景與目的： 非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfattyliverdisease，NAFLD)是指除外酒精和其他明確的損肝因素所致的，以彌漫性肝細(xì)胞大泡性脂肪變?yōu)橹饕卣鞯呐R床病理綜合征，其疾病譜包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纖維化及肝硬化等。隨著生活水平的提高和生活習(xí)慣的改變，NAFLD的患病率逐年升高，已成為一個(gè)全球性的公共衛(wèi)生問(wèn)題。NAFLD的發(fā)生與肥胖、2型糖尿病、高血壓等代謝性疾病關(guān)系密切，但其

2、發(fā)病危險(xiǎn)因素尚未完全闡明。B超和CT等影像學(xué)方法對(duì)診斷NAFLD有一定幫助，但不能有效地區(qū)分各種疾病階段；肝組織活檢仍然是當(dāng)前診斷NAFLD的金標(biāo)準(zhǔn)，但由于肝組織活檢具有一定的創(chuàng)傷性，其臨床應(yīng)用受到限制；因此臨床上迫切需要尋找一些高靈敏度和特異性的無(wú)創(chuàng)性NAFLD診斷方法。NAFLD以肝臟脂肪變性為主要特征，肝臟脂肪變性可對(duì)許多臨床實(shí)踐造成影響，其中肝臟缺血再灌注損傷是肝葉切除、肝外傷處理、肝移植過(guò)程中經(jīng)常遇到的問(wèn)題，缺血預(yù)處理在一定程

3、度上可減輕肝臟缺血再灌注損傷，但是不同程度肝臟脂肪變性是否對(duì)缺血預(yù)處理的保護(hù)作用造成影響目前尚不明確。本課題圍繞NAFLD發(fā)病危險(xiǎn)因素分析、血清診斷標(biāo)志物篩選、肝臟脂肪變性對(duì)缺血預(yù)處理保護(hù)作用的影響三部分內(nèi)容開展研究。 研究方法： 在NAFLD發(fā)病危險(xiǎn)因素分析方面，我們進(jìn)行了一項(xiàng)樣本量為8925人的橫斷面研究；通過(guò)比較NAFLD人群與對(duì)照人群血清尿酸水平的差異，以及不同尿酸水平人群NAFLD患病率的差異，并作NAFLD危

4、險(xiǎn)因素分析，以分析血清尿酸水平變化與NAFLD之間的可能聯(lián)系。在NAFLD血清診斷標(biāo)志物篩選方面，我們收集了35份經(jīng)肝臟組織學(xué)證實(shí)的NAFLD患者血清標(biāo)本和35份正常對(duì)照血清標(biāo)本，采用SELDI結(jié)合生物信息學(xué)分析，以篩選NAFLD血清診斷標(biāo)志物。在肝臟脂肪變性對(duì)缺血預(yù)處理保護(hù)作用的影響方面，我們運(yùn)用膽堿和蛋氨酸缺乏飲食建立了不同程度的小鼠肝臟脂肪變性模型，動(dòng)態(tài)觀察缺血預(yù)處理對(duì)肝臟保護(hù)作用的變化，并進(jìn)一步分析缺血預(yù)處理對(duì)肝臟ATP含量及A

5、TP5B蛋白表達(dá)的作用，為揭示肝臟脂肪變性對(duì)缺血預(yù)處理保護(hù)作用的影響機(jī)制提供線索。 結(jié)果： 橫斷面研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD人群的血清尿酸水平明顯高于對(duì)照人群(370.3±86.6vs.321.1±82.6μmol/L；P<0.001)；高尿酸血癥人群的NAFLD患病率明顯高于非高尿酸血癥人群(24.75％vs.9.54％；P<0.001)，且NAFLD患病率隨血清尿酸水平上升而增高(P<0.001)；多因素回歸分析顯示，高尿

6、酸血癥與NAFLD發(fā)病的危險(xiǎn)因素有關(guān)(OR:1.291，95％CI:1.067-1.564；P<0.001)。 SELDI結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NAFLD患者組與正常對(duì)照組血清存在135個(gè)差異質(zhì)荷比峰(上調(diào)59個(gè)/下調(diào)76個(gè))；借助生物信息學(xué)軟件，我們建立了一個(gè)基于血清蛋白質(zhì)指紋圖譜的NAFLD診斷模型，該模型敏感性和特異性分別為92.0％和88.0％；進(jìn)一步的盲法驗(yàn)證也顯示該診斷模型具有較高的靈敏度和特異性。 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，肝

7、臟缺血再灌注損傷程度隨肝臟脂肪變性程度的加重而加重，主要表現(xiàn)為血清ALT、AST水平的升高及肝臟病理學(xué)改變的加重；缺血預(yù)處理能顯著減輕正常肝臟和輕度脂變肝臟的缺血再灌注損傷，而對(duì)于中度和重度脂變肝臟，缺血預(yù)處理的保護(hù)作用消失；肝臟ATP含量及ATP5B表達(dá)變化趨勢(shì)與血清肝功能酶譜及肝臟病理學(xué)變化趨勢(shì)一致，提示不能有效改善肝臟能量代謝可能是缺血預(yù)處理保護(hù)作用消失的一個(gè)重要原因。 結(jié)論： 綜上，本研究得出以下結(jié)論：