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文檔簡介
1、目的:觀察大鼠在不同心功能狀態(tài)尾加壓素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)和腦鈉素(brain natriuretic peptide,BNP)含量變化規(guī)律與中醫(yī)辨證之間的相互關(guān)系,并探討其臨床意義。方法:雄性Wistar大鼠40只,體重(200±20)g,將其隨機(jī)分成心力衰竭(chronic heart failure,CHF)模型組30只,生理鹽水組(physiologic saline,NS)(正常對照組)10只。1.建立CHF模型:
2、取健康雄性Wistar大鼠30只,體重(200±20)g,皮下注射異丙腎上腺素(isoprenaline,ISO)(170mg/kg,分2次,間隔24小時,用生理鹽水配制成17mg/ml溶液,即10ml/kg),建立大鼠慢性心力衰竭(CHF)模型,ISO購自美國SIGMA公司。分別在用藥后2、4、8周進(jìn)行心功能測定,抽取靜脈血測定尾加壓素Ⅱ和腦鈉素含量并取心肌觀察病理形態(tài)學(xué)特征。2.正常對照組:取健康雄性Wistar大鼠10只,體重(2
3、00±20)g,皮下注射生理鹽水0.25ml[1]。3.模型鑒定:(1)同室常規(guī)飼養(yǎng),觀察大鼠的飲食、毛色、糞便、活動、紫紺、水腫等一般性狀,每周稱體重(body weight,BW),并根據(jù)大鼠癥狀及活動等表現(xiàn)將其分為心氣虛型和陽虛水泛型。記錄死亡大鼠的時間和死亡率。(2)心功能測定,經(jīng)頸總動脈測量左室收縮壓(left ventricular systolic pressure,LVSP),左室舒張末壓(leftventricular
4、 end-diastolic pressure,LVEDP)及左室壓力最大上升及下降速度(left ventricular developed pressure,±LVdp/dt)。(3)心功能測定結(jié)束后,摘取大鼠心、肝和肺,分別計算心、肝、肺臟質(zhì)量指數(shù)。(4)病理切片檢測:左心室心肌組織常規(guī)石蠟包埋切片,HE染色,顯微鏡觀察。4.血漿UⅡ濃度測定:用酶聯(lián)免疫法測定UⅡ含量。5.血漿腦鈉素(BNP)測定,用酶聯(lián)免疫法測定BNP含量。6.
5、數(shù)據(jù)分析:所有計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,應(yīng)用SP5S13.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計,方差齊性檢驗,單因素方差分析;多組間均數(shù)比較采用方差分析的F檢驗,計數(shù)資料用x2檢驗,相關(guān)分析采用線性相關(guān)分析,p>0.05,差異無統(tǒng)計學(xué)意義,p<0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,結(jié)果:1.大鼠一般情況及死亡率:與NS組大鼠比較,CHF模型組大鼠多有萎靡不振、乏力、皮毛干枯、活動和進(jìn)食相對減少,體溫下降、畏縮扎堆、縮肩拱背、足背水腫、唇舌紫暗或淡
6、白等虛寒征象,死亡率為20%,而NS組無一例死亡。組間率比較p<0.05,NS組大鼠一般情況無明顯變化。2.大鼠心肌病理切片觀察(HE染色):NS組大鼠心肌纖維排列整齊,細(xì)胞間隙正常,無心肌纖維斷裂破壞;CHF模型組大鼠心肌組織受損破壞,心肌纖維紊亂,部分?jǐn)嗔?心肌細(xì)胞間可見炎性細(xì)胞浸潤和充血表現(xiàn),部分肌源纖維溶解、消失;3.大鼠血漿UⅡ含量:與對照組比較,CHF組大鼠血漿UⅡ含量明顯升高,具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),并隨CHF
7、組大鼠周期延長,即心衰程度加重,UⅡ含量也隨之升高,CHF2周組(21.38±4.93)ng/ml,CHF4周組(47.63±14.24)ng/ml,CHF8周組(119.58±24.91)ng/ml;明顯高于對照組(5.20±1.25)ng/ml的含量。各組間兩兩比較均有統(tǒng)計學(xué)意義或顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。4.大鼠血流動力學(xué)測定:與對照組比較,CHF組LVSP,±LVdp/dtmax有明顯下降(P<0.01)。L
8、VEDP升高(P<0.01)。5.大鼠血漿BNP含量:模型2周組BNP濃度較正常對照組升高(P<0.05),模型4周組及8周組較正常對照組明顯升高(P<0.01)6.相關(guān)性分析:(1)血漿UⅡ水平與血漿BNP水平呈顯著正相關(guān),r=0.912(P<0.01);(2)血漿UⅡ水平與左心室收縮壓(LVSP)呈顯著負(fù)相關(guān),r=-0.800(P<0.01);(3)血漿UⅡ水平與左心室收縮壓最大上升速率(+dp/dt max)呈顯著負(fù)相關(guān),r=-0
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