高壓氧對(duì)前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)影響的研究及其臨床應(yīng)用價(jià)值的探討.pdf

1、一、研究背景： 目前隨著我國(guó)人口老齡化、人民生活水平的提高以及飲食結(jié)構(gòu)的變化,前列腺癌發(fā)病率正呈逐年上升趨勢(shì),對(duì)老年男性健康的影響正逐漸凸現(xiàn)出來(lái)。以上海地區(qū)為例,前列腺癌發(fā)病率在1985年是2.6/10萬(wàn)男性人口,2000年增長(zhǎng)到7.7/10萬(wàn)男性人口,2005年已達(dá)到10/10萬(wàn)男性人口。 高壓氧(hyperbaric oxygen,HBO)是指在海平面位置2-3倍標(biāo)準(zhǔn)大氣壓的環(huán)境下吸入100％的純氧,它可以使動(dòng)脈血氧

2、分壓超過(guò)2000mmHg,組織氧分壓接近400mmHg。HBO引起的組織氧分壓升高以及氧輸送增加不依賴(lài)于血紅蛋白,如此高濃度的氧可以產(chǎn)生一系列生物化學(xué)、細(xì)胞學(xué)以及生理學(xué)方面有益的影響。HBO現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于臨床之中,對(duì)于惡性腫瘤理論上講HBO能夠消除腫瘤自身缺氧所產(chǎn)生對(duì)于放療、化療等治療的抵抗性,從而提高相關(guān)治療的療效。但是自1966年Johnson和Lauehlan首先報(bào)道HBO可能具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用之后,陸續(xù)有類(lèi)似的個(gè)案報(bào)道

3、出現(xiàn),更加劇了人們的擔(dān)心,此后很長(zhǎng)一段時(shí)期惡性腫瘤及其病史被視為HBO治療的禁忌癥。目前HBO對(duì)于惡性腫瘤自然進(jìn)程的確切影響仍不清楚,對(duì)于腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)是否具有促進(jìn)生長(zhǎng)作用仍存有爭(zhēng)論。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為HBO并不促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),但是仍有相當(dāng)多的研究結(jié)果不支持此觀點(diǎn)；于此同時(shí),目前普遍認(rèn)為HBO本身對(duì)于腫瘤細(xì)胞并沒(méi)有明確的殺傷作用,單獨(dú)使用HBO治療惡性腫瘤并不具有療效,其治療作用往往是通過(guò)與其它治療方法的聯(lián)合應(yīng)用而得以實(shí)現(xiàn)。 通過(guò)

4、復(fù)習(xí)與本研究相關(guān)的文獻(xiàn)資料發(fā)現(xiàn),目前缺乏HBO對(duì)于前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)影響的實(shí)驗(yàn)性研究；對(duì)于HBO在前列腺癌治療中的應(yīng)用價(jià)值暫無(wú)實(shí)驗(yàn)研究方面的依據(jù)。針對(duì)上述現(xiàn)狀,設(shè)計(jì)本課題擬研究以下兩方面問(wèn)題：首先,HBO對(duì)于前列腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)是否具有促進(jìn)作用,臨床上應(yīng)用HBO治療前列腺癌患者是否安全?其次,HBO對(duì)于前列腺癌細(xì)胞是否具有增強(qiáng)其對(duì)放療、化療等治療敏感性的實(shí)驗(yàn)依據(jù),臨床中是否可以將HBO作為前列腺癌的輔助治療? 二、研究目的：

5、 1、研究高壓氧對(duì)前列腺癌LNCaP細(xì)胞株(激素依賴(lài)型)、PC-3細(xì)胞株(激素非依賴(lài)型)生長(zhǎng)的影響； 2、探討高壓氧在前列腺癌治療中的應(yīng)用價(jià)值。 三、研究方法： 1、將LNCaP細(xì)胞株、PC-3細(xì)胞株隨機(jī)分為對(duì)照組常壓常氧條件下培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)組每日進(jìn)行1次0.25 MPa(1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓=0.1 MPa)高壓氧暴露,持續(xù)70分鐘,連續(xù)5日； 2、分別應(yīng)用光學(xué)顯微鏡及透射電子顯微鏡、CCK-8細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒、流

6、式細(xì)胞儀以及Transwell遷移小室,對(duì)所有兩組細(xì)胞的形態(tài)學(xué)、增殖能力、細(xì)胞周期分布以及遷移能力進(jìn)行觀察比較； 3、構(gòu)建PC-3細(xì)胞株對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組SCID小鼠移植瘤模型,觀察并對(duì)比兩組移植瘤在生長(zhǎng)體積變化、瘤體微血管密度(MVD)、以及瘤細(xì)胞增殖(Ki-67蛋白)與凋亡(p53、p27蛋白)方面的差異。 四、結(jié)果： 1、不同處理組的兩類(lèi)細(xì)胞大體及超微形態(tài)結(jié)構(gòu)對(duì)比均未發(fā)現(xiàn)明顯改變,細(xì)胞增殖及遷移能力均不存在顯著

7、性差異(p>0.05); 2、流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示高壓氧導(dǎo)致LNCaP、PC-3細(xì)胞株在G2/M期的蓄積； 3、成功建立兩組PC-3細(xì)胞株移植瘤動(dòng)物模型,致瘤率為100％,腫瘤接種后第28天,對(duì)照組移植瘤體積為(433.6±12.8)mm3,實(shí)驗(yàn)組為(425.8±13.9)mm3,兩組移植瘤生長(zhǎng)體積變化差異無(wú)顯著性(p>0.05); 4、對(duì)照組移植瘤微血管密度及Ki-67、p53、p27蛋白表達(dá)的陽(yáng)性細(xì)胞率分別為2

8、0.1±2.31、(50.6±7.3)％、(30.5±4.7)％、(85.3±6.4)％,實(shí)驗(yàn)組分別為22.4±3.19、(55.2±6.7)％、(31.2±5.3)％、(80.4±5.7)％,病理學(xué)特征均無(wú)顯著性差異(p>0.05)。 五、結(jié)論： 1、高壓氧不促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的增殖,對(duì)前列腺癌中新生血管也無(wú)明顯影響,高壓氧可能不會(huì)促進(jìn)潛伏性前列腺癌的進(jìn)展,即前列腺癌患者接受高壓氧療可能是安全的； 2、高壓氧促使