亞毒性劑量THP聯(lián)合TRAIL對前列腺癌細胞Du145體外生長影響的研究.pdf

1、目的：通過研究亞細胞毒性劑量的化療藥物吡柔比星（THP）和腫瘤壞死因子相關的凋亡誘導配體（TRAIL）對前列腺癌體外生長的影響，探討兩藥單獨用藥和聯(lián)合用藥對人前列腺癌細胞Du145體外生長的影響，為TRAIL抗腫瘤作用的臨床應用提供一個新的實驗依據(jù)，可能為激素難治性前列腺癌的治療尋求一種新的方案。
　　方法：常規(guī)方法培養(yǎng)前列腺癌細胞Du145，給予不同濃度的THP和TRAIL，分為單用THP組、單用TRAIL組、THP+TRAIL

2、聯(lián)合組、對照組和空白組。各組影響因素作用24小時后，采用MTT比色法測定不同藥物濃度作用后，各組細胞生長抑制率，同時選定THP的亞毒性劑量。倒置相差顯微鏡下觀察各組細胞形態(tài)學變化以及生長情況，再采用Annexin V/PI雙染色法進行流式細胞術檢測前列腺癌細胞Du145的凋亡率。各組藥物刺激后，提取Du145細胞胞漿蛋白，采用Western-Blot法進行蛋白印跡顯影，檢測各組細胞胞漿蛋白內(nèi)caspase-3的表達。
　　結果：<

3、br>　　1、THP和TRAIL對人前列腺癌細胞株Du145均有抑制生長作用，THP的抑制作用較強，Du145細胞對其相對敏感。TRAIL雖有抑制作用，但Du145細胞對TRAIL并不敏感。
　　2、亞毒性劑量的THP聯(lián)合不同藥物濃度的TRAIL對Du145細胞有較強的抑制作用，并且呈現(xiàn)出較高的協(xié)同作用，其協(xié)同因子均大于1,最大協(xié)同因子CF=1.38807。
　　3、倒置相差顯微鏡下觀察不同藥物濃度刺激下，細胞出現(xiàn)不同程度的

4、死亡。見附圖。
　　4、流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn)藥物刺激后出現(xiàn)不同程度的凋亡，THP+TRAIL聯(lián)合組凋亡率最高。同時證明了協(xié)同殺傷作用是通過誘導細胞凋亡實現(xiàn)的。
　　5、采用Western-Blot法檢測藥物刺激后Du145細胞胞漿蛋白內(nèi)caspase-3蛋白的表達，顯影后可見THP+TRAIL聯(lián)合組刺激后的細胞胞漿蛋白內(nèi)caspase-3蛋白明顯高于單用藥物組和對照組。見附圖。
　　結論：THP和TRAIL對人前列腺癌細