Genistein與輻射聯(lián)合應(yīng)用于DU145前列腺癌細胞的實驗研究.pdf

1、浙江大學博士學位論文Genistein與輻射聯(lián)合應(yīng)用于DU145前列腺癌細胞的實驗研究姓名：嚴森祥申請學位級別：博士專業(yè)：外科學指導(dǎo)教師：鄭樹森20040601浙江大學博k學位論文orWesternblotting)用于檢測細胞周期相關(guān)蛋白包括周期素B1、cdc一2和p21“91的表達。結(jié)果通過分析各種濃度Genistein作用后DUl45細胞的克隆形成率，得出Genisteia作用于DUl45細胞的IC50約為30umol／L?？寺⌒?/p>

2、成試驗進一步顯示，Genistein在較低或中等濃度(5，15umol／L)下即可提高DUl45細胞的放射敏感性。單獨輻射和／或合用Genistein后24h，DNAladder提示細胞凋亡主要見于高濃度Genistein(J00“tool／L)處理組，72h后凋亡亦見于較低濃度Genistein組(30umol／L)。形態(tài)學：，TUNEL分析顯示凋亡細胞表現(xiàn)為紅色背景下的綠色或黃色熒光，且細胞形態(tài)相對較小，而DAPI染色辦呈現(xiàn)核濃縮、

3、核碎裂和凋亡小體形成等凋亡征象。Genistein單獨使用后可導(dǎo)致DUl45細胞G2／M期細胞周期阻滯，后者隨著Genistein作用濃度的增加而增加，f刊時伴之于G0／G1期或S期細胞的相應(yīng)減少；輻射(6Gy)亦能輕微增加G2／M期細胞；30“mol／L及以F濃度Genistein與輻射合用后能迸一步增加G2／M期細胞，但當濃度上升罕100umol／L時，相對于單獨使用Genistein，Genistein合用輻射反而減少了G2／M期

4、細胞，同時伴有S期細胞的相應(yīng)增加；在30lamol／L濃度Genistein與輻射合用組，延長觀察時間發(fā)現(xiàn)上述G2／M期細胞周期阻滯大部得到了維持，同時伴有凋亡和超二倍體細胞群的明顯增加。細胞周期相關(guān)蛋白分析提示，Genistein堆獨處理24h后，周期素B1暈現(xiàn)雙相變化，即起初隨著Genistein作用濃度的上升周期素B1逐漸增加，并在火約3()umol／L時達到峰值，100pmol／L時則繼而日月顯減少：單獨輻射亦能顯著增加周期素B