母系遺傳藥物性聾與非綜合征性聾的分子遺傳機(jī)制與功能研究.pdf

1、對(duì)一個(gè)氨基糖甙類藥物性聾和非綜合征聾的母系遺傳性中國(guó)大家系進(jìn)行遺傳學(xué)分析：在沒有接受氨基糖甙類抗生素時(shí)，一些母系遺傳的成員表現(xiàn)為程度不等的遲發(fā)/進(jìn)行性聽力下降，平均發(fā)病年齡自55歲(第2代)逐漸提前到10歲(第5代)。氨基糖甙類藥物可導(dǎo)致母系成員聽力下降，而且患者接受藥物的年齡似乎與聽力下降程度有關(guān)。對(duì)該家系成員進(jìn)行線粒體DNA測(cè)序發(fā)現(xiàn)：高度保守的12SrRNA基因中1494位點(diǎn)C突變?yōu)門，并且為同質(zhì)性突變，該C1494T突變可以使12

2、SrRNA形成新的U1494-1555A堿基配對(duì)，與耳聾相關(guān)的A1555G突變所造成的C1494-1555G堿基配對(duì)結(jié)構(gòu)相類似。當(dāng)培養(yǎng)液中含有氨基糖甙類抗生素時(shí)，有C1494T突變的4名聽力下降者和2名聽力正常成員的淋巴細(xì)胞系的細(xì)胞倍增時(shí)間較對(duì)照組淋巴細(xì)胞顯著延長(zhǎng)，并且這些淋巴細(xì)胞系的細(xì)胞氧消耗率顯著降低。隨后，將從該家系成員的淋巴細(xì)胞中的線粒體分別轉(zhuǎn)移到線粒體DNA缺乏的p0206細(xì)胞中，分形成各自的融合細(xì)胞系，然后對(duì)耳聾相關(guān)的線粒體

3、12SrRNAC1494T突變的生化特性進(jìn)行研究。其中有來自2名聽力正常者的6個(gè)融合細(xì)胞系、來自聽力下降者的9個(gè)融合細(xì)胞系，均有線粒體DNAC1494T突變，它們的線粒體蛋白質(zhì)合成進(jìn)行同位素標(biāo)記，發(fā)現(xiàn)其線粒體蛋白質(zhì)合成速率分別比對(duì)照組4名成員的12個(gè)融合細(xì)胞系下降了38％和43％。顯然，這些缺陷可以導(dǎo)致攜帶C1494T突變的融合細(xì)胞(不論來自聽力正常者還是來自聽力下降者)的細(xì)胞總體呼吸率下降或蘋果酸/谷氨酸、琥珀酸/三磷酸甘油或TMPD

4、/抗壞血酸所始動(dòng)的呼吸率下降。而且，和對(duì)照組的細(xì)胞系相比，有C1494T突變的聽力正常者或聽力下降者的融合細(xì)胞系在含有/不含有高濃度巴龍霉素的DMEM培養(yǎng)液中，細(xì)胞倍增時(shí)間比值呈非常顯著的一致性增加。 通過此課題研究，觀察到的這些資料直接證明了線粒體DNAC1494T突變與氨基糖甙類藥物性聾和非綜合征性聾有關(guān)。我們的試驗(yàn)結(jié)果也首次以直接的生化學(xué)證據(jù)證明：線粒體12SrRNA的A位點(diǎn)是氨基糖甙類藥物性聾的主要作用位點(diǎn)；另外，我們的