熱休克蛋白70基因轉(zhuǎn)染對人心室肌細(xì)胞的保護(hù)作用乙醇預(yù)處理人心室肌細(xì)胞抗過氧化氫損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、全文共分三部分.第一部分,熱休克蛋白70 (HSP70)基因轉(zhuǎn)染對人心室肌細(xì)胞的保護(hù)作用.該研究用陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移技術(shù),將人HSP70基因轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的人心室肌細(xì)胞 中,觀察外源性HSP70基因表達(dá)及其對人心室肌細(xì)胞抗模擬缺血損傷能力的影響,探討利用基因治療手段保護(hù)人類心肌的可行性.結(jié)論:①該實(shí)驗(yàn)利用陽離子脂質(zhì)體DOTAP介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移技術(shù),使外源性HSP70基因在體外培養(yǎng)的人心室仙細(xì)胞中獲得高水平表達(dá);②經(jīng)外源性HSP70基

2、因轉(zhuǎn)染的心室肌細(xì)胞在無應(yīng)激因子作用時(shí)即可高水平表達(dá)HSP70,其抗模擬缺血損傷的能力與經(jīng)熱休克處理的心室肌細(xì)胞無顯著差異,HSP70是熱休克反應(yīng)中起主要作用的介導(dǎo)因子;③該課題為利用基因轉(zhuǎn)染的方法保護(hù)人心肌細(xì)胞提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù).第二部分,乙醇預(yù)處理人心室肌細(xì)胞抗過氧化氫損傷的實(shí)驗(yàn)研究.該研究用乙醇預(yù)處理體外培養(yǎng)的人心室肌細(xì)胞,觀察HSP70表達(dá)及心肌細(xì)胞對過氧化氫損傷的耐受能力,并利用反義基因技術(shù),探討乙醇預(yù)處理心肌細(xì)胞抗過氧化氫損傷的機(jī)

3、理.結(jié)論:①乙醇預(yù)處理可誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的人心室肌細(xì)胞發(fā)生熱休克反應(yīng),心室肌細(xì)胞中HSP70 mRNA和HSP70的表達(dá)水平上升.②心肌細(xì)胞經(jīng)乙醇預(yù)處理24小時(shí)后,其抵抗過氧化氫損傷的能力明顯提高.③利用反義基因片段阻斷乙醇預(yù)處理誘導(dǎo)的HSP70表達(dá),可取消其抗過氧化氫損傷能力,證明HSP70是乙醇預(yù)處理保護(hù)作用的主要介導(dǎo)因子.第三部分,人心室肌細(xì)胞的體外培養(yǎng).該研究旨在建立人心室肌細(xì)胞原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)和鑒定的方法,為人類心血管疾病的研究