藍(lán)莓VcLON2蛋白酶對植物抗逆的影響.pdf

1、碩士學(xué)位論文藍(lán)莓VcLON2蛋白酶對植物抗逆的影響指導(dǎo)教師姓名、職稱醫(yī)塞苤塾拯單位地址逝、江省全堡壹迪塞太道魚晝墨曼申請學(xué)位級別亟專業(yè)生物絲堂皇僉王生物堂論文提交時(shí)間2Q!魚生三旦論文答辯時(shí)間2Q!魚生三旦學(xué)位授予單位和日期逝、江!!亙菹太堂2Q!魚生魚旦答辯委員會主席盛征、江論文評閱人2016年5月藍(lán)莓VcLON2蛋白酶對植物抗逆的影響摘要環(huán)境脅迫是作物維持產(chǎn)量的主要挑戰(zhàn)之一，在高溫、干旱或鹽害等逆境下，活性氧(ROS)的穩(wěn)態(tài)平衡會被

2、擾亂，導(dǎo)致蛋白質(zhì)等生物大分子氧化損傷。這些氧化損傷蛋白質(zhì)的及時(shí)清除及細(xì)胞器內(nèi)各蛋白質(zhì)質(zhì)量的控制是維護(hù)細(xì)胞正常結(jié)構(gòu)、功能的重要條件。LON2蛋白酶是一種定位于過氧化物酶體的ATP依賴的絲氨酸類型蛋白酶，目前在擬南芥等模式植物中的研究表明，LON2蛋白酶與過氧化物酶體中蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和損傷、淘汰過氧化物酶體的自噬相關(guān)。盡管目前己知LON2蛋白酶可以對過氧化物酶體中的蛋白進(jìn)行降解，但是關(guān)于其在調(diào)控ROS穩(wěn)態(tài)和控制過氧化物酶體中氧化蛋白水平中的功

3、能尚不明確，尤其是在應(yīng)對逆境所引發(fā)的氧化脅迫下的作用機(jī)理未見報(bào)道。本研究從藍(lán)莓(Vacciniumspp)中分離了VcLON2eDNA序列，并分析了藍(lán)莓VcLON2的時(shí)空表達(dá)，再將VcLDⅣ2遺傳轉(zhuǎn)化本氏煙和對本氏煙肋￡ON2進(jìn)行RNAi處理，結(jié)果表明LON2蛋白酶可以調(diào)控過氧化物酶體中與緩解氧化脅迫損傷相關(guān)的抗氧化酶活性。具體研究如下：從藍(lán)莓中分離出VcLON2eDNA序列，全長2667bp，編碼888個(gè)氨基酸，理論等電點(diǎn)pI為668

4、，分子量為9828kDa。VcLON2的氨基酸序列中包含一個(gè)典型的C端過氧化物酶體定位信號(PTSl)，與擬南芥LON2蛋白酶具有高度的同源性(氨基酸相似性84％)。qRTPCR結(jié)果表明，在正常生長條件下，VcLON2在藍(lán)莓所有組織中都有表達(dá)，在衰老或過度成熟的器官中比幼嫩或未成熟的器官表達(dá)量更高；用NaCI、干旱和高溫等逆境處理，藍(lán)莓葉片中的VcLON2的表達(dá)量顯著升高。表明VcLON2蛋白酶可能與植物衰老和抗逆相關(guān)。為了研究VcLO