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文檔簡介
1、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)感染可引起母豬繁殖障礙、仔豬呼吸道疾病、免疫抑制。豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAM)是PRRSV感染的主要靶細(xì)胞。本研究用PRRSVHB-2(sh)/2002體外和體內(nèi)感染PAM,分析PAM外源性抗原加工遞呈相關(guān)分子的表達(dá)動態(tài)和抗原遞呈能力的變化,檢測PAM凋亡情況及其PRRSV核酸動態(tài)變化,從細(xì)胞與分子水平揭示PRRSV感染對PAM外源性抗原加工遞呈功能的影響?! ?yīng)用RT-PCR從PAM中擴增和克隆外源性
2、抗原加工遞呈相關(guān)SLA-DR分子、Ii鏈、CD40及PRRSVORF7的部分基因片段,并利用反向PCR技術(shù)構(gòu)建了相應(yīng)的缺失cDNA競爭分子。采用競爭PCR方法,建立了各種分子的定量競爭RT-PCR的標(biāo)準(zhǔn)競爭曲線和直線回歸方程。 采用自身混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(AMLR)對PAM抗原遞呈能力的分析結(jié)果顯示,感染后3、7、28和42天PAM的抗原遞呈能力下降,說明PRRSV對PAM的抗原遞呈能力可產(chǎn)生長時間的抑制作用,這可能是PRRSV造成免
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