“脾為生痰之源”在肺系疾病中的實(shí)質(zhì)研究.pdf

1、本課題從有形之痰角度研究脾虛和健脾藥物對(duì)肺系痰證COPD模型大鼠粘液分泌的影響,并觀察脾虛和健脾藥物對(duì)模型大鼠免疫炎癥、氧化應(yīng)激、營養(yǎng)、細(xì)胞凋亡等指標(biāo)的影響,從免疫炎癥機(jī)制、氧化應(yīng)激機(jī)制、營養(yǎng)機(jī)制、細(xì)胞凋亡等方面探討脾虛生痰的機(jī)制,以揭示在肺系痰證中“脾為生痰之源”理論的實(shí)質(zhì),深化對(duì)其的理解與認(rèn)識(shí),為該理論指導(dǎo)臨床實(shí)踐、拓展應(yīng)用范圍提供新的思路和理論依據(jù)。
　　選取48只健康Wistar大鼠,隨機(jī)分為以下4組:空白對(duì)照組、COPD

2、模型組、大黃致脾虛COPD模型組、六君子湯健脾治療組,采用煙熏加氣管滴注脂多糖的方法復(fù)制COPD模型,采用灌服大黃作為致使脾虛的方法,采用灌服六君子湯作為健脾的方法。
　　觀察指標(biāo):1.觀察大鼠咳嗽,氣喘,口鼻分泌物,活動(dòng)狀況,毛發(fā)光澤度,糞尿,食量,體重等一般情況;2.計(jì)算造模前后大鼠體重的變化;3.肺組織外觀;4.酚紅排泄實(shí)驗(yàn)觀察各組大鼠氣道粘液的分泌情況;5.收集支氣管肺泡灌洗液并進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù);6.計(jì)算脾臟指數(shù);7.觀察

3、各組大鼠HE染色的肺組織病理改變;8.采用免疫組化法測(cè)定各組大鼠粘蛋白(MUC5AC)的表達(dá);9.放射免疫法測(cè)肺組織勻漿IL-2、TNF-α含量;10.放射免疫法測(cè)血液中丙二醛(MDA)含量;11. TUNEL法檢測(cè)肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)。應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　本實(shí)驗(yàn)以酚紅排泄量和肺組織MUC5AC表達(dá)量作為肺內(nèi)有形之痰的測(cè)量指標(biāo),以肺組織勻漿TNF-a含量和肺泡支氣管灌洗液細(xì)胞分類計(jì)數(shù)作為評(píng)估肺

4、內(nèi)炎癥水平的指標(biāo),以脾臟指數(shù)、肺組織勻漿IL-2含量作為評(píng)估肺部免疫狀況的指標(biāo),以體重變化作為評(píng)估模型營養(yǎng)狀況的指標(biāo)。
　　本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),脾虛對(duì)COPD模型動(dòng)物以上各指標(biāo)的影響有顯著差異,健脾藥物六君子湯對(duì)以上各指標(biāo)也有不同程度的影響。研究結(jié)果表明,COPD模型存在粘液高分泌,脾虛可進(jìn)一步加重粘液高分泌,健脾中藥六君子湯可顯著減輕氣道粘液高分泌,并且對(duì)免疫炎癥指標(biāo)、氧化應(yīng)激指標(biāo)、營養(yǎng)指標(biāo)、細(xì)胞凋亡等指標(biāo)亦有明顯影響,提示脾虛和健