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文檔簡介
1、本課題從有形之痰角度研究脾虛和健脾藥物對肺系痰證COPD模型大鼠粘液分泌的影響,并觀察脾虛和健脾藥物對模型大鼠免疫炎癥、氧化應激、營養(yǎng)、細胞凋亡等指標的影響,從免疫炎癥機制、氧化應激機制、營養(yǎng)機制、細胞凋亡等方面探討脾虛生痰的機制,以揭示在肺系痰證中“脾為生痰之源”理論的實質,深化對其的理解與認識,為該理論指導臨床實踐、拓展應用范圍提供新的思路和理論依據。
選取48只健康Wistar大鼠,隨機分為以下4組:空白對照組、COPD
2、模型組、大黃致脾虛COPD模型組、六君子湯健脾治療組,采用煙熏加氣管滴注脂多糖的方法復制COPD模型,采用灌服大黃作為致使脾虛的方法,采用灌服六君子湯作為健脾的方法。
觀察指標:1.觀察大鼠咳嗽,氣喘,口鼻分泌物,活動狀況,毛發(fā)光澤度,糞尿,食量,體重等一般情況;2.計算造模前后大鼠體重的變化;3.肺組織外觀;4.酚紅排泄實驗觀察各組大鼠氣道粘液的分泌情況;5.收集支氣管肺泡灌洗液并進行細胞分類計數(shù);6.計算脾臟指數(shù);7.觀察
3、各組大鼠HE染色的肺組織病理改變;8.采用免疫組化法測定各組大鼠粘蛋白(MUC5AC)的表達;9.放射免疫法測肺組織勻漿IL-2、TNF-α含量;10.放射免疫法測血液中丙二醛(MDA)含量;11. TUNEL法檢測肺組織細胞凋亡指數(shù)。應用SPSS11.5統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據進行統(tǒng)計學處理。
本實驗以酚紅排泄量和肺組織MUC5AC表達量作為肺內有形之痰的測量指標,以肺組織勻漿TNF-a含量和肺泡支氣管灌洗液細胞分類計數(shù)作為評估肺
4、內炎癥水平的指標,以脾臟指數(shù)、肺組織勻漿IL-2含量作為評估肺部免疫狀況的指標,以體重變化作為評估模型營養(yǎng)狀況的指標。
本實驗研究發(fā)現(xiàn),脾虛對COPD模型動物以上各指標的影響有顯著差異,健脾藥物六君子湯對以上各指標也有不同程度的影響。研究結果表明,COPD模型存在粘液高分泌,脾虛可進一步加重粘液高分泌,健脾中藥六君子湯可顯著減輕氣道粘液高分泌,并且對免疫炎癥指標、氧化應激指標、營養(yǎng)指標、細胞凋亡等指標亦有明顯影響,提示脾虛和健
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