彎曲菌抗體對(duì)結(jié)腸神經(jīng)節(jié)作用的初步研究.pdf

1、目的： 腸神經(jīng)異常性疾病是目前影響嬰幼兒健康的小兒外科常見(jiàn)疾病，患兒腸神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞在病變結(jié)腸上發(fā)生數(shù)量、質(zhì)量和分布上的異常導(dǎo)致一系列的病理生理變化，最主要的臨床表現(xiàn)是便秘，并伴有一系列的消化道癥狀。其基本病理病因是腸段的神經(jīng)節(jié)變性或者缺如。神經(jīng)節(jié)變性缺如目前認(rèn)為主要是由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果。近年來(lái)進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)毒素、炎癥等環(huán)境因素直接損傷也是一個(gè)很重要的原因。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)巨細(xì)胞病毒感染可以引起消化道神經(jīng)節(jié)細(xì)胞變性

2、。而對(duì)小腸結(jié)腸炎的研究發(fā)現(xiàn)細(xì)菌感染如：梭狀芽孢桿菌，沙門(mén)氏菌等，是導(dǎo)致先天性巨結(jié)腸并發(fā)小腸結(jié)腸炎的重要原因。由此我們認(rèn)為細(xì)菌感染可能通過(guò)細(xì)菌毒素或者其他途徑的直接作用造成神經(jīng)節(jié)細(xì)胞變性壞死，進(jìn)一步導(dǎo)致腸道功能障礙。腸道彎曲菌是革蘭陰性微需氧彎曲菌，存在廣泛，容易傳播，感染率高，被認(rèn)為是引起全世界人類(lèi)細(xì)菌性腹瀉的主要原因，在我國(guó)最近的調(diào)查表明1～2歲小兒腹瀉空腸彎曲菌檢出率最高。而空腸彎曲菌可以通過(guò)粘附、侵襲、產(chǎn)生毒素和分子模擬機(jī)制等作用

3、，與神經(jīng)組織成份結(jié)合，引起局部神經(jīng)病理?yè)p傷如格林巴林綜合癥。但是彎曲菌對(duì)腸道神經(jīng)系統(tǒng)有無(wú)損傷作用?通過(guò)什么機(jī)制導(dǎo)致腸道神經(jīng)系統(tǒng)損傷?未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)免疫組化的方法觀察空腸彎曲菌抗體對(duì)結(jié)腸正常神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和變性壞死的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的作用。從而初步分析腸道彎曲菌抗體對(duì)結(jié)腸神經(jīng)節(jié)的毒性作用。 材料與方法： 實(shí)驗(yàn)一：取2005-2006年山大二院行結(jié)腸造瘺，腸梗阻，腸套疊手術(shù)切除結(jié)腸病例30例。患兒年齡最小為1月，最大為4.5

4、歲，平均年齡為2.234±1.73歲，其中男性18例，女性12例。所有患兒術(shù)后病理證實(shí)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞正常。10﹪的福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋組織切片備用。所有標(biāo)本隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。分別對(duì)標(biāo)本行免疫組化處理，觀察腸道彎曲菌抗體與結(jié)腸正常神經(jīng)節(jié)細(xì)胞結(jié)合情況。實(shí)驗(yàn)二：本實(shí)驗(yàn)取2005-2006年山大二院行先天性巨結(jié)腸手術(shù)切除結(jié)腸病例30例。其中2例為長(zhǎng)段型，2例為短段型，其余為普通型?；純耗挲g最小為2個(gè)月，最大為6歲，平均年齡為3.53±

5、1.97歲，其中男性21例，女性9例。所有患兒術(shù)前均為鋇灌腸、肛門(mén)直腸測(cè)壓證實(shí)為先天性巨結(jié)腸，術(shù)后病理證實(shí)符合先天性巨結(jié)腸的病理表現(xiàn)。分別對(duì)標(biāo)本行免疫組化處理，觀察腸道彎曲菌抗體與不同腸段神經(jīng)節(jié)細(xì)胞結(jié)合情況。 兩組實(shí)驗(yàn)的結(jié)果以神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性，并根據(jù)染色強(qiáng)度和數(shù)量，由病理專(zhuān)家判定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS11.0分析，P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： (1)正常結(jié)腸的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)空腸

6、彎曲菌抗體與神經(jīng)節(jié)細(xì)胞結(jié)合的棕色顆粒，其陽(yáng)性率為83.3﹪，而對(duì)照組很少發(fā)現(xiàn)空腸彎曲菌抗體結(jié)合的棕色顆粒，其陽(yáng)性率為10﹪，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (2)巨結(jié)腸正常段正常神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)和擴(kuò)張段變性神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)棕色顆粒，其陽(yáng)性率分別為為76.7﹪，53.3﹪，擴(kuò)張段壞死神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)少見(jiàn)棕色顆粒，其陽(yáng)性率分別為6.7﹪。對(duì)各組結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)正常神經(jīng)節(jié)細(xì)胞與變性神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，壞死神經(jīng)節(jié)細(xì)胞有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，壞死神經(jīng)節(jié)細(xì)