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文檔簡介
1、目的:急性肺損傷(ALI)是臨床上危重病患者常見的嚴重并發(fā)癥,是機體遭受嚴重感染、休克、創(chuàng)傷、胃內容物吸入等多種原因打擊時引起的以肺泡毛細血管膜通透性增加為特征的肺部炎癥綜合癥,發(fā)病急、病情重,甚至可以發(fā)展為急性呼吸窘迫綜合癥(ARDS)。常見病因可以分為兩大類:間接因素和直接因素。前者包括嚴重感染、休克等,后者包括胃內容物吸入、重癥肺炎等。 ARDS是以肺內皮細胞和肺上皮細胞嚴重受損為特征的肺實質的急性炎癥反應,伴有致炎和抗炎
2、因子的失控性釋放。雖然對ARDS的炎癥機制的認識取得了重大突破,但是對不同病因ARDS的炎癥機制,包括蛋白滲漏、炎癥介質水平的差異及其原因認識較少。盡管目前對其治療措施有很大進展,但ARDS的病死率仍居高不下,約在50%左右,治療方面亟待取得重大突破。糖皮質激素為一種多途徑抗炎藥物,但是其在ARDS中的臨床應用一直存在爭議,不同原因誘發(fā)的ARDS激素治療效果差異懸殊,但原因不明,幾十年來一直令臨床醫(yī)師倍感困惑。為此,本課題以動物模型模擬
3、常見不同誘因所致ARDS,探討激素干預效果差異及其可能的機理。 假設糖皮質激素的治療效果和其致病因素是相關的,為此同步復制了LPS靜脈注射和HCl吸入致ARDS的大鼠動物模型,橫向比較兩種不同模型炎癥因子的釋放水平、病理學變化及對糖皮質激素的反應性。 方法:試驗用SD大鼠96只,隨機分為6組:①NS組,②LPS組,③HCl組,④NS+Dex組,⑤LPS+Dex組,⑥HCl+Dex組。每個組又隨機分為兩個亞組:非灌洗組和灌
4、洗組(病理組),每組8只動物。④、⑤、⑥三組為激素干預組。造模前2天腹腔注射Dex(2mg/kg),1次/天,造模前再注射一次,總共3次。①、④二組為對照組,尾靜脈注射生理鹽水;②、⑤二組為LPS組,尾靜脈同部位注射LPS(8mg/kg);③、⑥二組為HCl組,氣管內滴入pH值為1.8的HCl(2ml/kg)。 復制模型后4小時,非灌洗組每組8只動物,1%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(5mg/100gb.w),經頸動脈插管放血處死動物
5、,收集血液,離心(3000rpm,4℃,10min),吸取上清,-80℃保存,檢測血清中TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10的含量。取左肺下部,Bowin液固定,常規(guī)石蠟包埋做病理切片,觀察肺組織病理形態(tài)學變化并評分。取左肺上部W/D的測定(80℃,48h)。灌洗組每組8只動物,1%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(5mg/100gb.w),經氣管插管行全肺支氣管肺泡灌洗,取支氣管肺泡灌洗液(BALF),離心(1200rpm,4℃,10m
6、in),吸取上清,-80℃保存,檢測血清中TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10的含量和蛋白水平。細胞沉淀懸浮于等量生理鹽水中,進行細胞計數和分類計數。 結論: 1.靜脈注射LPS和氣管內滴入HCl均造成大鼠的急性肺損傷,成功地復制了兩種不同病因所致ALI模型。 2.兩個模型組在蛋白滲漏、因子水平、肺病理均存在一定的差異,說明ALI的病理生理過程和致病因素是緊密相連的。 3.糖皮質激素的干預效果和病
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