窖蛋白-1與飲食誘導(dǎo)肥胖及相關(guān)心血管疾病的關(guān)系.pdf

1、目的：以SD大鼠為研究對(duì)象，研究高脂飲食誘導(dǎo)大鼠發(fā)生肥胖及對(duì)肥胖大鼠進(jìn)行飲食干預(yù)后血管窖蛋白-1(caveolin-1)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase，eNOS)表達(dá)的變化，以探討飲食影響肥胖與心血管疾病的可能機(jī)制，為預(yù)防肥胖及肥胖相關(guān)心血管疾病的發(fā)生提供切實(shí)可行的依據(jù)。 方法：清潔級(jí)雄性SD大鼠36只，體重150～160g，按體重隨機(jī)分為兩組：基礎(chǔ)對(duì)照組(9只，CF)喂以基礎(chǔ)

2、飼料，試驗(yàn)組(27只)用高脂飼料喂養(yǎng)15周誘導(dǎo)大鼠肥胖。第15周時(shí)，大鼠體重穩(wěn)定，根據(jù)對(duì)照組體重判斷肥胖大鼠(DIO)，將DIO組一半改用基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)(DIO-HF/LF)，另一半繼續(xù)高脂飲食(DIO-HF)；對(duì)照組維持基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，繼續(xù)喂養(yǎng)8周。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始和干預(yù)實(shí)驗(yàn)前，過(guò)夜禁食10h采尾血，分離血清檢測(cè)空腹血糖和血脂。實(shí)驗(yàn)期間每日觀察大鼠一般情況，每周稱(chēng)體重。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組大鼠過(guò)夜禁食10h斷頭處死，收集全血，分離血漿和血清，置-20℃

3、冰箱保存，以備血糖、血脂等指標(biāo)的測(cè)定。分離睪周(睪丸周?chē)?、腎周、腰周和腸系膜等部位脂肪組織并準(zhǔn)確稱(chēng)重。分離主動(dòng)脈置液氮凍存后轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱保存，用免疫印跡(WesternBlot)方法測(cè)定窖蛋白-1和eNOS蛋白表達(dá)水平，免疫組化方法原位觀察窖蛋白-1的表達(dá)，并用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)測(cè)定窖蛋白-1的基因水平。 結(jié)果：飲食干預(yù)前，DIO大鼠體重、空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)等指標(biāo)與對(duì)

4、照組相比均有顯著性差異(P＜0.05)。低脂飲食干預(yù)后，DIO-HF組體重、脂肪濕重、脂體比、TG、血管caveolin-1結(jié)果高于DIO-HF/LF和CF組(P＜0.05)，血管eNOS表達(dá)DIO-HF組低于DIO-HF/LF和CF組(P＜0.05)，而DIO-HF/LF組與CF組相比，除體重有顯著性差異外(P＜0.05)，其余各指標(biāo)之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 結(jié)論：①高脂飼料可誘導(dǎo)SD大鼠發(fā)生肥胖，對(duì)肥胖大鼠進(jìn)行

5、低脂飲食干預(yù)可減少脂肪的蓄積，有利于控制肥胖發(fā)展的趨勢(shì)。②肥胖大鼠中窖蛋白-1表達(dá)升高、eNOS表達(dá)降低，可導(dǎo)致內(nèi)皮功能失調(diào)從而增加心血管疾病的危險(xiǎn)性。③肥胖大鼠改喂低脂飲食可降低血管caveolin-1的表達(dá)，并恢復(fù)eNOS的蛋白水平，通過(guò)改善內(nèi)皮功能降低心血管疾病的危險(xiǎn)性。 創(chuàng)新點(diǎn)：目前國(guó)內(nèi)外對(duì)窖蛋白-1的研究主要集中在對(duì)內(nèi)皮功能的調(diào)節(jié)及其與冠心病的關(guān)系方面，而飲食誘導(dǎo)肥胖對(duì)窖蛋白-1的影響，尤其是膳食干預(yù)對(duì)肥胖大鼠窖蛋白-