HA納米載體轉hGM-CSF HepG2疫苗聯(lián)合低劑量順鉑抗肝癌荷瘤鼠的實驗觀察.pdf

1、目的:聯(lián)合應用HA納米轉GM-CSF HepG2疫苗與順鉑治療Hu-PBL-SCID荷瘤小鼠模型，應用肝癌動物模型來研究肝癌疫苗免疫治療荷瘤小鼠的效果，同時比較肝癌疫苗聯(lián)合不同劑量順鉑化療對肝癌的治療效果，以期探討肝癌治療的新方法以及最佳方案，為尋找合理和規(guī)范的化療與腫瘤疫苗聯(lián)合應用方案提供依據(jù)，使免疫化療方案為人類腫瘤的治療提供希望和戰(zhàn)勝癌癥的信心。
　　方法:制備HA納米轉GM-CSF HepG2疫苗以及建造Hu-PBL-SC

2、ID荷瘤小鼠模型，并測量裸鼠腫瘤尺寸，然后將符合成瘤標準的荷瘤小鼠隨機分為采用不同方案進行治療的以下四組，每組5只:(1)對照組:僅以生理鹽水0.2 ml/只注射小鼠腹腔，每天一次，連續(xù)14天;(2)疫苗組:予以轉hGM-CSF HepG2疫苗(1×107/ml)0.2 ml/只注射右側背部皮下，7天后再重復注射一次;(3)小劑量順鉑聯(lián)合疫苗組（簡稱LDM聯(lián)合組）:2mg/(kg.d)順鉑注射小鼠腹腔，每天一次，連續(xù)3天后給予轉hGM-

3、CSF HepG2疫苗(1×107/ ml)0.2 ml/只注射右側背部皮下，7天后再重復上述步驟;(4)最大耐受劑量順鉑聯(lián)合疫苗組（簡稱MTD聯(lián)合組）:順鉑9mg/(kg.d)一次性注入小鼠腹腔，3天后予轉hGM-CSF HepG2疫苗(1×107/ml)0.2 ml/只注射右側背部皮下，7天后再重復上述步驟。通過以下指標對各組HepG2荷瘤小鼠治療后的療效進行檢測:(1)采用MTT法（噻唑藍比色法）檢測各組小鼠脾細胞CTL活性;(2

4、)采用ELISA方法檢測各組小鼠血清TGF-α、INF-γ水平以及脾指數(shù)。(3)觀察小鼠體質量及毒副反應;(4)測小鼠瘤體積、瘤質量及抑瘤率;
　　結果:(1)轉基因腫瘤疫苗與Hu-PBL-SCID荷瘤小鼠模型制備成功。(2)各組小鼠的CTL殺傷活性以LDM聯(lián)合組為最強，差異具有統(tǒng)計意義(P＜0.05);疫苗組以及MTD聯(lián)合組的CTL殺傷活性比對照組強(P＞0.05)。(3)各組小鼠血清的TNF-α、IFN-γ水平及脾指數(shù)以LDM