靶向VEGF-siRNA抑制人肝癌細胞HepG2裸鼠成瘤的實驗研究.pdf

1、原創(chuàng)性l聲明本人聲明，所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南華大學或其他單位的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。作者簽名：菇日期：妒9年譬月腳關于學位論文使用授權說明本人同意南華大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權保留學位論文，允許學位

2、論文被查閱和借閱；學校可以公布學位論文的全部或部分內容，可以采用復印、縮印或其它手段保留學位論文；學校可根據國家或湖南省有關部門規(guī)定送交學位論文。作者簽名：伊堯導師簽名：／丕塒期：紗‘7年夕月Ⅸ日j18398A抑制人肝癌細胞HepG2裸鼠成瘤的實驗研究中文摘要目的：探討人肝癌細胞血管內皮生長因子(VEGF)干擾質粒(psuperretroneo—VEGFsiRNA)對人肝癌細胞株HepG2裸鼠移植瘤生長的靶向抑制作用。方法：利用已設計并

3、合成好的特異性靶向VEGF的siRNA片段，構建HepG2／psuperretroneoVEGFsiRNA表達載體，并將其轉入HepG2細胞。通過G418抗性篩選出穩(wěn)定株，移植裸鼠成瘤，同時設立對照組。根據體積的均數值繪制腫瘤生長曲線，以HE染色法觀察質粒處理后瘤組織的病理改變，Western—blot檢測腫瘤組織中VEGF的表達變化，免疫組化SP法檢測瘤組織內微血管密度。結果：成功建立人肝癌細胞株HepG2裸鼠移植瘤模型，HepG2／

4、psuperretroneoVEGF—siRNA組與HepG2／psuperretroneo組、HepG2組相比，腫瘤生長受到抑制，腫瘤體積較小，成瘤潛伏期明顯延長(PO05)；瘤重抑制率為6901％，明顯高于HepG2／psuperretroneo組和HepG2組(P001)；病理學檢查發(fā)現HepG2／psuperretroneo—VEGF—siRNA組癌細胞較少，異型性小，免疫組化標記微血管密度(MVD)明顯下降(PO05)，而He

5、pG2／psuperretroneo組、HepG2組癌細胞多，異型性大，且血管豐富；Westernblot分析表明：HepG2／psuperretroneo—VEGF—siRNA組與HepG2／psuperretroneo組、HepG2組相比，瘤組織內VEGF蛋白表達明顯下調(P005)。結論：l、成功建立人肝癌細胞株HepG2／psuperretroneoVEGFsiRNA裸鼠移植瘤模型2、構建的HepG2／psuperretrone