亞急性暴露下喹烯酮對SD大鼠免疫毒性及其作用機制研究.pdf

1、喹烯酮(Quinocetone,簡稱QCT)是由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所研究合成的一類喹惡啉類藥物,具有喹惡啉-l,4-二氧化物(quinoxaline-1,4-dioxides,QdNOs)的基本結(jié)構(gòu),可抑制腸道內(nèi)多種細菌的生長和繁殖,包括金葡菌、沙門氏菌及大腸桿菌等,主要用于牛、豬及家禽以發(fā)揮其促生長、改善腸道菌群、促進蛋白質(zhì)吸收及合成作用。近年來,有研究發(fā)現(xiàn)喹惡啉類衍生物卡巴氧和喹乙醇,具有潛在的誘突變性和致癌性。由于喹

2、烯酮與該兩種藥物具有相同的基本結(jié)構(gòu),喹烯酮藥物的使用安全性也逐漸受到人們的關(guān)注。相關(guān)資料顯示,QCT可能導(dǎo)致哺乳動物細胞株的強致突變作用,對HepG2細胞株引起DNA損傷。但目前有關(guān)QCT引起的免疫毒性研究有限,因此選用Sparague-Dawley大鼠(簡稱SD大鼠)進行喹烯酮亞慢性暴露,以評價喹烯酮對于哺乳動物的免疫毒性作用,并通過氧化應(yīng)激狀態(tài)對其相關(guān)機制進行探討。
　　目的:探討亞急性QCT暴露對SD大鼠的免疫毒性作用,并初

3、步探討QCT致免疫毒性與氧化應(yīng)激的相互關(guān)系。
　　方法:健康雄性SD大鼠32只,隨機分為以下四組:正常對照組(control):0mg/kg/day;喹烯酮低劑量組(QCT-H):50mg/kg/day;喹烯酮中劑量組(QCT-M):800mg/kg/day;喹烯酮高劑量組(QCT-H):2400mg/kg/day。每日記錄體重及進食量,喂養(yǎng)至28天采用頸椎脫臼處死,記錄脾臟、胸腺等主要臟器重量,留置一半脾臟作組織病理檢查,剩余部

4、分制備單細胞懸液,以絲裂原刺激法測量T、B淋巴細胞增殖能力、以YAC-1細胞作靶細胞測定NK細胞殺傷活性。彗星實驗評價脾分離細胞的DNA損傷程度。制作脾組織冰凍切片,進行DHE染色,觀察熒光強度,并計算其平均熒光密度。制備脾線粒體勻漿,檢測GSH水平及GPx,SOD和CAT活力。
　　結(jié)果:(1)高劑量QCT組SD大鼠脾臟組織表現(xiàn)出脾竇淤血改變;T、B淋巴細胞,NK細胞活性顯著降低,差異有顯著性(P<0.01)。
　　(2)

5、彗星實驗結(jié)果顯示喹烯酮暴露組OTM值與TailDNA值較對照組均可見劑量依賴性增加,中、高劑量組與對照組檢測結(jié)果存在顯著性差異(P<0.01)。
　　(3)脾細胞ROS水平呈劑量依賴性升高,喹烯酮高劑量組GSH、CAT、GPx與對照組相比均出現(xiàn)顯著降低(P<0.01)。
　　結(jié)論:高劑量喹烯酮亞急性暴露能夠引起SD大鼠免疫靶器官組織損傷,且能導(dǎo)致脾組織DNA損傷,提示其對哺乳動物存在潛在的免疫毒性。喹烯酮亞急性暴露引起的免疫