納米磁流體介導(dǎo)的pEGFP-AFP-hTNFα對(duì)裸鼠體內(nèi)肝癌細(xì)胞殺傷作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：在前期試驗(yàn)證實(shí)納米磁流體作為基因載體具有較高的轉(zhuǎn)染效率的基礎(chǔ)上，研究納米磁流體介導(dǎo)的pEGFP-AFP-hTNFα對(duì)人肝癌細(xì)胞系裸鼠BALB/c皮下移植瘤模型的抑瘤作用。 方法：建立人原發(fā)性肝癌裸鼠皮下移植瘤模型，將荷瘤裸鼠隨機(jī)分成空白對(duì)照組、純納米磁流體組、純pEGFP-AFP-hTNFα組、納米磁流體pEGFP-AFP-hTNFα組4組。于瘤體內(nèi)分別直接注射質(zhì)粒pEGFP-AFP-hTNFα、納米磁流體pEGFP-AF

2、P-hTNFα，純納米磁流體，觀察不同時(shí)段皮下腫瘤的生長(zhǎng)情況并做病理學(xué)檢查，免疫組化法檢測(cè)腫瘤微血管密度（MVD），原位末端標(biāo)記（TUNEL）法檢測(cè)細(xì)胞原位凋亡。同時(shí)，定量檢測(cè)腫瘤裸鼠治療前后的AFP值，并電鏡下觀察腫瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化，以及用RT-PCR檢測(cè)腫瘤鼠心，肺，腎的人腫瘤壞死因子表達(dá)情況。 結(jié)果：裸鼠皮下成瘤率100％；納米磁流體pEGFP-AFP-hTNFα組的腫瘤體積31.28±13.82mm3、血清AFP含量

3、36.26±5.46u/l、腫瘤MVD4.34±0.98均明顯低于對(duì)照組腫瘤體積96.85±16.22血清AFP含量145.64±5.43腫瘤MVD10.60±0.69（P<0.05），而細(xì)胞凋亡指數(shù)8.35±0.24，明顯高于對(duì)照組5.15±0.47（P<0.05），可見較多的凋亡細(xì)胞。RT-PCR示腫瘤鼠心、肺，腎未見hTNFα表達(dá)，而腫瘤細(xì)胞則出現(xiàn)hTNFα的表達(dá)。 結(jié)論：納米磁流體作為基因載體，具有較高的轉(zhuǎn)染效率，因而納