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文檔簡介
1、許多研究和臨床實踐證明,神經(jīng)病學(xué)和精神病學(xué)這兩個學(xué)科,在科研方向、研究方法、理論體系、診斷和治療手段上交叉越來越多。神經(jīng)科醫(yī)生在臨床工作中接診大量精神領(lǐng)域的患者;為數(shù)不少的神經(jīng)科疾病以精神癥狀為首發(fā)表現(xiàn)或伴發(fā)精神癥狀;及時識別和處理神經(jīng)疾病伴發(fā)的精神癥狀可促進神經(jīng)功能的恢復(fù);而且一直被定義為“功能性”疾病的精神分裂癥和情感障礙也顯示了腦器質(zhì)性改變的基礎(chǔ)。所以,學(xué)科間廣泛的合作和交流,神經(jīng)科醫(yī)生兼具精神科知識,是深入認識腦的疾病以及認知行
2、為障礙的前提,也是今后學(xué)科發(fā)展的方向。 目的: 本實驗旨在應(yīng)用神經(jīng)科學(xué)的研究思路和方法,探討神經(jīng)科常見精神障礙抑郁癥的發(fā)病機制。通過設(shè)計能反映抑郁癥患者核心臨床表現(xiàn)的情感語言刺激模式,觀察首發(fā)重度抑郁癥患者的fMRI激活腦區(qū),并在激活區(qū)域鑒定差異表達蛋白質(zhì),以揭示抑郁癥發(fā)病機制的器質(zhì)性腦代謝基礎(chǔ),為深入研究神經(jīng)科疾病伴發(fā)的其他精神障礙研究和腦的高級認知功能研究提供范例,并為神經(jīng)精神病學(xué)的發(fā)展做一有益探索。 方法:
3、 本實驗分三部分:第一部分,首發(fā)重度抑郁癥患者的腦功能磁共振研究;第二部分,抑郁癥動物模型的制備;第三部分,抑郁大鼠海馬組織的腦蛋白組學(xué)研究。主要方法及技術(shù)路線如下: 1.根據(jù)抑郁癥患者的核心臨床表現(xiàn)——情感障礙和思維語言障礙,建立功能磁共振(fMRI)情感語言語境聯(lián)想刺激模式。 2.按照納入和排除標(biāo)準(zhǔn)收集重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院精神科及心理咨詢門診初診病人 20 例,經(jīng)美國精神障礙診斷和統(tǒng)計手冊第四版(DSM-
4、Ⅳ)確診。年齡、性別構(gòu)成比一致的健康對照20例。所有研究對象用自制調(diào)查表嚴格篩選和隨訪。用 24 項漢密爾頓抑郁量表(HAMD-24)評定患者病情嚴重程度。用漢語失語癥成套測驗(ABC)對患者的語言障礙進行評定。常規(guī)頭顱磁共振(MRI)掃描,排除顱內(nèi)結(jié)構(gòu)異常。在初發(fā)病未用藥階段,采用情感語言語境聯(lián)想刺激模式,揭示抑郁癥患者發(fā)病機制的神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)。 3.成年雄性Sprague-Dawley 大鼠10只,隨機分為抑郁組和對照組,抑
5、郁組采用慢性不可預(yù)見輕度刺激(CUMS),制作抑郁癥動物模型。7 種不同刺激交替出現(xiàn) 21 天后,進行曠野試驗(OFT)和蔗糖水消耗試驗(SWCT),判斷造模是否成功。 4.參照本研究中抑郁癥患者的激活腦區(qū),在模型動物上取相應(yīng)區(qū)域腦組織,樣品經(jīng)預(yù)處理,用三氯乙酸法(TCA)提取腦組織蛋白質(zhì),以 Bradford 法測定蛋白濃度、雙向凝膠電泳分離蛋白點、考馬斯亮藍染色和銀染。將圖象分析的差異蛋白質(zhì)斑點脫色,膠上原位酶切,進行基質(zhì)輔
6、助激光解析/電離-飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)分析。所得數(shù)據(jù)在NCBInr數(shù)據(jù)庫檢索、鑒定蛋白質(zhì)。 結(jié)果: 1.HAMD-24 評定患者為重度抑郁癥,且HAMD-24量表因子分和ABC評價,提示抑郁癥患者有明顯的情緒障礙和思維阻滯,思維貧乏,言語緩慢,反應(yīng)遲鈍,注意力難以集中,主動性減退,交流困難。常規(guī)頭顱MRI掃描,未見顱內(nèi)結(jié)構(gòu)異常。 2.按照情緒的三個主要維度理論,篩選了能引起正性、負性、中性情緒
7、的二字漢語詞匯,建立了情感語言語境聯(lián)想刺激模式。 3.重度抑郁患者的負性任務(wù)主要激活了右額葉眶回(BA11)、左額葉直回(BA11)、左額中央前回(BA6)、右頂中央后回(BA40)、左扣帶后回、左尾狀核頭和右小腦前葉。正性任務(wù)主要激活了左頂楔前葉、右顳上回(BA38)、左顳上回(BA38)、右海馬回、右海馬鉤回(BA34)、右尾狀核頭、左尾狀核體、右島葉(BA13)和右枕梭狀回(BA37)。 4.3周造模結(jié)束時,抑郁組
8、大鼠的糖水消耗量,水平運動和垂直運動次數(shù)都明顯下降,和對照組比較有顯著性差異(P<0.05)。 5.抑郁組大鼠海馬組織蛋白質(zhì)點數(shù)分別為1594、 1624、 1609,平均為1609.00±15.00點,正常組大鼠海馬組織蛋白質(zhì)點數(shù)分別為1571、1628、1648,平均為1615.67±29.78點。兩組2-DE圖譜的匹配率為72%,其中27個蛋白點在兩組間有顯著的量的改變。差異點集中在pH4.0~9.7,分子量集中在25~7
9、0KD。 6.查詢數(shù)據(jù)庫鑒定了15個差異蛋白質(zhì)點,其中鈣網(wǎng)織蛋白前體、原肌球蛋白1、雙重特異性的活化分裂素蛋白激酶激酶1和細胞分裂素活化蛋白激酶1,這4個與神經(jīng)發(fā)生相關(guān)蛋白表達較正常組顯著下降(P<0.05)。 結(jié)論: 1.重度抑郁癥患者有明顯的情感語言障礙,情感語言語境聯(lián)想刺激模式能很好的反映未用藥物初發(fā)重度抑郁癥患者的腦激活模式。 2.CUMS 模型抑郁動物表現(xiàn)出的抑郁狀態(tài)、活動能力下降、興趣喪失與人
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