沉默Aurora-B通過PI3K-Akt-NF-κB信號通路抑制骨肉瘤細胞侵襲和遷移的體外研究.pdf

1、I分類號：密級：UDC：學號：406521212485南昌大學碩士研究生學位論文沉默沉默AuraB通過通過PI3KAktNFκB信號通路抑制骨肉瘤細胞侵襲和遷移的體外研究信號通路抑制骨肉瘤細胞侵襲和遷移的體外研究KnockdownofAuraBinhibitsosteosarcomacellinvasionmigrationviamodulatingPI3KAktNFκBsignalingpathway朱糧博朱糧博培養(yǎng)單位（院、系）：南

2、昌大學第一附屬醫(yī)院指導教師姓名、職稱：舒勇主任醫(yī)師教授博士生導師劉志禮副主任醫(yī)師副教授碩士生導師申請學位的學科門類：醫(yī)學學科專業(yè)名稱：外科學（骨科）論文答辯日期：國家自然科學基金項目資助（No.81260400）江西省教育廳科學基金項目資助（No.GJJ12097）江西省自然科學基金項目資助（No.20142BAB205056）答辯委員會主席：評閱人：年月日摘要II摘要摘要目的目的:本研究旨在體外探討沉默AuraB基因表達通過PI3KA

3、ktNFκB信號通路對人骨肉瘤細胞的侵襲和遷移的影響。方法：方法：構建干擾AuraB基因表達的慢病毒載分別命名為LVshAURKB（LVshAURKB1、LVshAURKB2、LVshAURKB3）和陰性對照載體LVNC。分別轉染人骨肉瘤細胞株U2OS細胞和HOS細胞。qRTPCR檢測AuraB基因的mRNA水平。Transwell侵襲實驗和劃痕愈合實驗檢測U2OS細胞和HOS細胞侵襲和遷移情況。采用免疫組化方法研究24例伴有肺轉移的骨

4、肉瘤標本中AuraB和pAkt（Ser473）蛋白的表達情況，并分析它們的相關性。WesternBlot檢測轉染LVshAURKB后AuraB、pAkt（Ser473）、Akt、pPI3K(Tyr199)、PI3K、NFκB（p65）、βactin蛋白表達水平。結果：結果：①qRTPCR和WesternBlot實驗結果顯示與對經轉染陰照載體組對比，轉染了LVshAURKB組骨肉瘤細胞的AuraB的mRNA和蛋白水平明顯降低；②Trans