癌基因c-fos在三氧化二砷作用于腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞中的研究.pdf

1、目的:通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)觀察三氧化二砷(arsenic trioxide，As2O3)對(duì)腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞的生長(zhǎng)作用情況及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用，并檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)c-fos表達(dá)量的變化，從而對(duì)As2O3抑制ACC-2細(xì)胞生長(zhǎng)的作用機(jī)制進(jìn)行探討，為As2O3應(yīng)用于臨床提供理論依據(jù)。
　　方法:(1)用不同濃度的As2O3分別作用于ACC-2細(xì)胞24h、48h及72h，于顯微鏡下觀察ACC-2細(xì)胞的形態(tài)變化及生長(zhǎng)情況;(2)用RT-PCR法檢

2、測(cè)不同的藥物濃度處理ACC-2細(xì)胞24h及48h后c-fos基因在mRNA水平上的表達(dá)變化情況;(3)免疫組化法觀察藥物作用前后c-fos蛋白表達(dá)量的變化。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理、分析數(shù)據(jù)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為a=0.05。
　　結(jié)果:(1)As2O3可抑制ACC-2細(xì)胞的生長(zhǎng)，隨著藥物濃度的升高及作用時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞的抑制作用加強(qiáng)，顯微鏡下觀察可見(jiàn)細(xì)胞變小變圓，并有空泡樣變，貼壁細(xì)胞減少，懸浮細(xì)胞增多，部分細(xì)胞發(fā)生壞死及凋亡;

3、(2) RT-PCR結(jié)果表明c-fos mRNA在ACC-2細(xì)胞的表達(dá)量高，而隨著As2O3作用濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)，其表達(dá)量明顯下降，并具有時(shí)間和劑量依賴(lài)性，在6-mol/L作用48h時(shí)表達(dá)量最低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.00);(3)免疫組化檢測(cè)結(jié)果示c-fos蛋白表達(dá)于細(xì)胞核，胞漿不著色，胞核呈棕黃色或褐色，c-fos蛋白在ACC-2細(xì)胞中呈高表達(dá)，As2O3作用于ACC-2細(xì)胞后，其表達(dá)量降低，并具有時(shí)間劑量依賴(lài)關(guān)系，