抗鏈霉素單克隆抗體制備與ELISA方法的建立.pdf_第1頁(yè)
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1、為探索一種能快速而有效監(jiān)測(cè)食品中鏈霉素殘留的方法,該研究利用合成的鏈霉素-肟與牛血清白蛋白偶聯(lián),制備成全抗原后免疫Balb/c小鼠,用雜交瘤技術(shù)建立了一株能穩(wěn)定分泌抗鏈霉素單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,命名為3B<,1>-G<,12>-C<,12>,并對(duì)此細(xì)胞進(jìn)行了鑒定和抗體應(yīng)用的初步研究.3B<,1>-G<,12>-C<,12>抗體的鑒定結(jié)果為:抗體屬IgG<,1>亞類;與雙氫鏈霉素的交叉反應(yīng)率為120％,與慶大霉素、卡那霉素、新霉素的交

2、叉反應(yīng)均小于0.1％.間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞上清抗體效價(jià)為1:10<'4>以上,腹水抗體效價(jià)為1:10<'8>以上.秋水仙素阻抑法計(jì)算該細(xì)胞染色體數(shù)平均為96,體外傳代培養(yǎng)和凍存復(fù)蘇后分泌抗體穩(wěn)定.以3B<,1>-G<,12>-C<,12>單抗為基礎(chǔ),建立了間接競(jìng)爭(zhēng)性抑制ELISA方法,該方法對(duì)硫酸鏈霉素的最低檢出量為2ng/ml,尿及牛奶添加回收率為90％~105％.與其它方法綜合對(duì)照最低檢出量、效率、精確度、費(fèi)用等參數(shù)可得出用

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