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文檔簡介
1、該研究利用基因工程的方法重組、表達(dá)了人CⅡ功能性多肽CⅡ250-270(recombinant human collagen type Ⅱ peptide 250-270,rh CⅡ250-270),經(jīng)分離、純化并進(jìn)一步驗(yàn)證其初步具有預(yù)期的免疫學(xué)活性.該研究利用基因工程及分子生物學(xué)技術(shù)將含有人CⅡ250-270多聚基因的表達(dá)載體pGEX-4T-1(由該實(shí)驗(yàn)室提供)轉(zhuǎn)化E.coliBL21工程菌,融合表達(dá)目的蛋白,經(jīng)Glutathione
2、 Spharose 4B親和層析柱分離純化,12﹪聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分析和凝膠薄層掃描測量其分子量和純度.為了進(jìn)一步驗(yàn)證rhCⅡ250-270是否具有同化學(xué)合成的CⅡ250-270相似的免疫學(xué)活性,該研究建立了一種用流式細(xì)胞儀同時(shí)測定T淋巴細(xì)胞增殖與細(xì)胞因子分泌的方法.為進(jìn)一步探討MHCII類分子在特異性T細(xì)胞活化中的作用,該研究采用敏感性較高的特異性引物法,對(duì)RA患者和健康對(duì)照組DR4基因及其亞型進(jìn)行分析.該研究構(gòu)
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