白介素-1β和γ-干擾素在升主動脈瘤和Ⅰ型胸主動脈夾層中的表達研究.pdf

1、胸主動脈瘤(Thoracic aortic aneurysm,TAA)和胸主動脈夾層(Thoracic aorticdissection,TAD)是血管外科常見的致死性疾病,病理改變主要為胸主動脈處形成瘤樣擴張,因此又可統(tǒng)稱為胸主動脈擴張性疾病。TAA和TAD的發(fā)病機制至今不明,胸主動脈管壁的薄弱被認為是和血流動力學異常同等重要的病因之一。然而,什么原因導致了管壁的薄弱及其具體作用機制尚不明確。不僅如此,由于發(fā)病機制不明,TAA和TAD

2、的手術時機和手術方式的選擇,目前的爭議也較大。因此,對胸主動脈管壁的研究,不僅可以為TAD和TAA發(fā)病機制的闡明提供依據,更有助于手術方式和時機的選擇,甚至可以為TAD和TAA的內科藥物治療提供可能的分子靶點。 研究目的：1)通過研究胸主動脈管壁的平滑肌細胞凋亡情況,基質金屬蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表達,白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)和γ-干擾素(I

3、nterferon-γ,INF-γ)的表達和定位及其與臨床相關參數的關系,來推測IL-1β和INF-γ在TAD和TAA形成過程中的可能作用；2)通過研究信號轉導蛋白p38和JNK蛋白在TAD和TAA的表達和定位,初步探討IL-1β和INF-γ在TAD和TAA中的可能信號轉導方式,為IL-1β和INF-γ在TAD和TAA發(fā)病中的作用奠定理論基礎。 研究方法：1)選取2005年2月-2007年3月間本院手術切除的11例TAD標本和1

4、0例TAA標本,另取7例非主動脈疾病的主動脈管壁為正常對照,TUNEL染色觀察管壁平滑肌細胞凋亡情況,免疫組織化學染色觀察胸主動脈中膜IL-1β、IFN-γ和MMP-9陽性細胞數和細胞定位,免疫蛋白印跡和實時定量PCR分析7例TAD標本和6例TAA標本中膜IL-1β和IFN-γ的蛋白和mRNA含量,將管壁平滑肌細胞凋亡情況,IL-1γ、IFN-γ和MMP-9表達情況與臨床相關參數(年齡、吸煙、高血壓、白細胞、主動脈最大直徑等)進行統(tǒng)計學

5、分析,找出與IL-β和IFN-γ表達可能相關的臨床危險因素；2)對7例TAD標本和6例TAA標本管壁磷酸化p38和JNK蛋白進行免疫組織化學和免疫蛋白印跡分析,并與IL-1β和IFN-γ蛋白含量進行相關性分析,找出其與IL-1β和IFN-γ的可能關系,推測IL-1β和IFN-γ在細胞內的可能信號轉導方式。 結果：1)IL-1β的蛋白含量在TAA和TAD組中表達較對照組為高(P<.0001),TAA組中表達較TAD組高(P=0.0

6、002),主要分布于主動脈管壁平滑肌細胞和炎性細胞(T細胞和巨噬細胞)的細胞漿中；IFN-γ的蛋白含量在TAA組中表達較TAD和對照組為高(P<.0001和P=0.0002),主要分布于主動脈管壁炎性細胞的細胞漿中,TAD和對照組蛋白含量無明顯差異(P=0.2335);TAA和TAD組中MMP-9的陽性細胞數和染色程度較對照組為高(P=0.0098和P=0.0023),主要分布于主動脈管壁平滑肌細胞和炎性細胞的細胞漿中。2)TAD組主動

7、脈管壁炎性細胞中IL-1β和MMP-9的陽性細胞數和染色程度呈正相關；TAA組主動脈管壁炎性細胞中IFN-γ和MMP-9的陽性細胞數和染色程度呈正相關。3)TAD和TAA組細胞凋亡較對照組明顯升高(P<.0001和P=0.0001),TAD組較TAA組明顯升高(P<.0001);TAA組IFN-γ蛋白含量與動脈直徑呈正相關(P=0.0012),TAD組IFN-γ蛋白含量與全身白細胞數和平滑肌細胞凋亡程度呈正相關(P=0.0025和P=0

8、.0212),TAA組動脈壁炎性細胞中IFN-γ陽性細胞數和染色程度在高血壓組中較非高血壓組為高且有統(tǒng)計學差異(P=0.0333)。4)磷酸化的p38蛋白含量在TAD和TAA組中與IL-1β的表達量呈正相關(P=0.0362和P=0.0416),磷酸化的p38蛋白和JNK蛋白與IL-1β和IFN-γ的染色細胞分布基本一致。 結論：1)TAA中IL-1β和INF-γ高表達,INF-γ可能通過增加炎性細胞中MMP-9的表達和主動脈管