印跡基因H19、LIT1和MEST在肺癌發(fā)生中的作用機(jī)制研究.pdf

1、基因印跡(genomic imprinting)為近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的遺傳規(guī)律，與胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育，罕見(jiàn)的遺傳病，腫瘤發(fā)生有著密切的聯(lián)系，且解釋了許多孟德?tīng)栆?guī)律無(wú)法企及的現(xiàn)象，其意義正逐漸被認(rèn)識(shí)，研究也日趨深入．傳統(tǒng)的孟德?tīng)栆?guī)律指出：胚胎從父親和母親遺傳的兩個(gè)拷貝即等位基因(alleles)均有同等的機(jī)會(huì)表達(dá)而與其親代來(lái)源無(wú)關(guān)，但近年來(lái)發(fā)現(xiàn)一小部分基因的表達(dá)取決于這些基因是源自父親還是源自母親，這種等位基因表達(dá)取決于親本來(lái)源的現(xiàn)象即是基因印跡，

2、即某些基因呈親源依賴性的單等位基因表達(dá)，另一等位基因不表達(dá)或表達(dá)極弱。具有這種現(xiàn)象的基因稱為印跡基因(imprinted gene)?；蛴≯E在人類遺傳性疾病尤其是腫瘤發(fā)生中的作用正引起越來(lái)越多的關(guān)注。越來(lái)越多的研究表明印跡基因的反常包括印跡丟失(1oss of imprinting，LOI)即雙等位基因表達(dá)，在腫瘤的發(fā)生中起著一定作用。 H19基因定位于人11號(hào)染色體，為母源表達(dá)，父源印跡，且只表達(dá)為RNA，不翻譯成蛋白，其具

3、體功能尚不清楚，有研究顯示其在腫瘤發(fā)生中起著生長(zhǎng)抑制作用。許多研究發(fā)現(xiàn)，H19基因不僅在兒童胚胎惡性腫瘤而且在成人許多惡性腫瘤中發(fā)生LOI。長(zhǎng)QT內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄子1(long QTintronic transcript 1，LIT1)定位于人11號(hào)染色體，為母源印跡，父源表達(dá)，是KvLQT1基因的父源性等位基因的反義轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，與p57kIP2基因印跡的維持有關(guān)。在一些惡性腫瘤中亦發(fā)現(xiàn)了LIT1基因發(fā)生LOI。中胚葉特異性轉(zhuǎn)錄子(又名父源表達(dá)

4、基因-1)(Mesoderm-specific transcript，MEST)位于人類染色體7q32，是一種母源印跡父源表達(dá)的基因，有報(bào)道在某些惡性腫瘤中其過(guò)度表達(dá)與其發(fā)生LOI相關(guān)。有關(guān)三種印跡基因印跡狀態(tài)改變與肺癌的關(guān)系的研究，國(guó)外鮮見(jiàn)報(bào)道，國(guó)內(nèi)未見(jiàn)報(bào)道。 目的： 探討人肺癌組織中印跡基因H19、LIT1和MEST印跡缺失情況及在肺癌發(fā)生中的可能作用機(jī)制。 方法： 采用PCR技術(shù)結(jié)合限制性酶切片段長(zhǎng)

5、度多態(tài)性分析法(restriction fragment length polymorphism，RFLP)篩選出32例人肺癌組織及相應(yīng)的癌旁組織中具有H19、LIT1和MEST基因雜合性病例，然后采用RT-PCR-RFLP法檢測(cè)H19、LIT1和MEST印跡狀態(tài)。 結(jié)果： 在32例病例組中，H19、LIT1和MEST基因的雜合子信息個(gè)體分別為14個(gè)、4個(gè)和13個(gè)，雜合性比率分別為43.8％(14/32)、12.5％(4

6、/32)和40.6％(13/32)；H19和MEST在肺癌組織中雙等位基因表達(dá)率分別為28.6％(4/14)和53.8％(7/13)，而在相應(yīng)癌旁組織中雙等位基因表達(dá)率均為0，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，LIT1在肺癌組織及相應(yīng)癌旁組織中雙等位基因表達(dá)率分別為25％(1/4)和0，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論： 肺癌組織中可檢測(cè)到H19和MEST基因的發(fā)生LOI，H19和MEST基因的LOI可能參與了肺