H19對孤雌胚胎干細胞多能性的作用研究.pdf

1、胚胎干細胞具有多能性而且具有無限增殖能力和分化潛能。人的胚胎干細胞對于治療退化性病變有很大幫助。但是人的胚胎干細胞研究充滿了倫理道德方面的問題。孤雌胚胎干細胞是一種從激活的卵子中分離出來的多能性干細胞，沒有破壞自然存在的胚胎，因而避免了很多倫理道德上的問題。孤雌胚胎以及孤雌胚胎干細胞沒有發(fā)育上的全能性是因為它們的基因印跡不正常。H19是一個在胚胎發(fā)育過程中以及干細胞分化過程中高表達的印跡基因。H19的表達受到處于其基因上游的印跡調(diào)控區(qū)的

2、控制。H19基因的功能目前還不是很清楚。H19基因敲除的小鼠是存活并可育的。而且如果在孤雌胚胎中敲除了H19，孤雌發(fā)育的時間能夠進行的更長。更重要的是，如果結(jié)合了核移植技術(shù)以及H19基因敲除，就能得到?jīng)]有精子參與其發(fā)育過程的小鼠，而且這種小鼠還能夠正常繁殖后代。因此H19有可能在孤雌胚胎以及孤雌胚胎干細胞中行使著一定功能。
　　 我們首先比較了孤雌胚胎干細胞與正常受精胚胎干細胞中H19的表達情況，H19在孤雌胚胎干細胞中的表達要

3、高一些。接下來我們運用RNA干擾技術(shù)在孤雌胚胎干細胞中對H19表達進行干擾。在我們的實驗中，降低H19表達并不影響孤雌胚胎干細胞的多能性以及自我更新的能力。我們又在體內(nèi)和體外實驗中對孤雌胚胎干細胞進行了分化。在體外分化實驗中，降低H19表達后，細胞中出現(xiàn)心肌樣跳動的比例增加，而且跳動頻率也加快了，這與檢測心肌相關(guān)基因表達上調(diào)的結(jié)果是相一致的。同時我們也發(fā)現(xiàn)體外實驗中降低H19表達能夠使得向表皮分化增加。體內(nèi)的分化實驗結(jié)果中，H19干擾的