大豆異黃酮聯(lián)合葡萄籽提取物原花青素對(duì)2型糖尿病大鼠抗氧化功能和胰島細(xì)胞凋亡影響的研究.pdf

1、目的：通過(guò)建立2型糖尿病大鼠動(dòng)物模型，觀察糖尿病大鼠胰島細(xì)胞凋亡情況，探討大豆異黃酮( SIF)聯(lián)合葡萄籽原青花素(GSPE)對(duì)2型糖尿病大鼠胰島β細(xì)胞凋亡的干預(yù)，為探討天然抗氧化物質(zhì)對(duì)糖尿病的預(yù)防和治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法：SPF級(jí)雄性SD大鼠，先隨機(jī)分為兩組：正常對(duì)照組(A組)；高脂飼養(yǎng)組。正常對(duì)照組用普通飼料喂養(yǎng)，高脂飼養(yǎng)組用高脂飼料喂養(yǎng)，4周后，檢測(cè)各組大鼠TG(總甘油三酯)，TC(總膽固醇)，F(xiàn)BG(空腹血糖)，F(xiàn)IN

2、S(空腹胰島素)含量，1％小劑量注射鏈尿左菌素(STZ)，誘導(dǎo)2型糖尿病模型。第6周確定造模成功后，將高脂飼養(yǎng)組大鼠隨機(jī)分成3組：糖尿病對(duì)照組(B組)，SIF+GSPE250mg/kg.d+250mg/kg.d劑量干預(yù)組(C組)，SIF+GSPE50mg/kg.d+50mg/kg.d劑量干預(yù)組(D組)。A組，B組給消毒自來(lái)水灌胃；C組，D組給不同劑量SIF+GSPE灌胃干預(yù)。第10周后實(shí)驗(yàn)終止處死大鼠，取大鼠血清和胰腺檢測(cè)下列指標(biāo)：1用

3、羅氏血糖儀取大鼠鼠尾靜脈血檢測(cè)各組大鼠大豆異黃酮聯(lián)合葡萄籽原青花素干預(yù)前后的血糖值。2制作光鏡病理切片做HE染色，觀察胰腺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)；3檢測(cè)各組大鼠血清中超氧化物岐化酶(SOD)，丙二醛(MDA)-氧化氮(，NO)，谷胱甘肽(GSH)含量；4 TUNEL法檢測(cè)各組大鼠胰腺組織細(xì)胞凋亡情況；5免疫組化法檢測(cè)凋亡因子Caspase-3在各組大鼠胰島中表達(dá)；6檢測(cè)大鼠血清中TNF-α(腫瘤壞死因子α)，IFN-γ(γ干擾素)的含量。

4、 結(jié)果：1通過(guò)高脂飼料喂養(yǎng)，大鼠體重，空腹血糖，甘油三酯，總膽固醇以及胰島素含量顯著增加，胰島素敏感指數(shù)下降，與正常對(duì)照組相比差異顯著(p<0.05)，小劑量注射STZ后大鼠血糖升高>16.7mmol/L;2糖尿病對(duì)照組機(jī)體內(nèi)的SOD，GSH含量下降，NO，MDA含量升高，與正常對(duì)照組比較差異顯著有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，大豆異黃酮聯(lián)合葡萄籽原青花素干預(yù)組大鼠血清內(nèi)的SOD，GSH，MDA，NO含量與糖尿病對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

5、(p<0.05).3通過(guò)對(duì)大鼠血清中的TNF-α，IFN-γ含量檢測(cè)，TUNEL法胰島細(xì)胞凋亡形態(tài)的觀察，免疫組化檢測(cè)Caspase-3蛋白表達(dá)，發(fā)現(xiàn)糖尿病對(duì)照組大鼠胰島細(xì)胞的各項(xiàng)凋亡指標(biāo)與正常組比較均升高(p<0.05)。大豆異黃酮聯(lián)合葡萄籽原青花素干預(yù)組大鼠與糖尿病對(duì)照組比較有所下降，差異顯著(p<0.05)。 結(jié)論：1通過(guò)高脂飼養(yǎng)聯(lián)合小劑量注射STZ成功建立2型糖尿病大鼠模型；2糖尿?qū)φ战M機(jī)體內(nèi)的氧化與抗氧化系統(tǒng)平衡破壞出