hTERT啟動(dòng)子調(diào)控p53基因表達(dá)對(duì)T24細(xì)胞凋亡的作用.pdf

1、腫瘤的基因靶向治療是通過(guò)將具有組織特異性的啟動(dòng)子序列與治療基因偶聯(lián)使治療基因在腫瘤細(xì)胞中特異性表達(dá)，從而可以減輕對(duì)正常組織的損傷。人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因(humantelomerasereversetranscriptase，hTERT)啟動(dòng)子具有在端粒酶陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞中特異表達(dá)的特點(diǎn)，使其成為實(shí)現(xiàn)腫瘤基因靶向治療的重要工具。p53基因具有抑制細(xì)胞增殖、啟動(dòng)細(xì)胞凋亡作用。在許多腫瘤細(xì)胞中p53基因突變導(dǎo)致其表達(dá)降低是腫瘤發(fā)生的原因之一。因此

2、，我們?cè)囼?yàn)將hTERT啟動(dòng)子與野生型p53基因偶聯(lián)，將成功構(gòu)建的phTERT-p53載體，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染端粒酶陽(yáng)性的膀胱腫瘤T24細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞凋亡率變化、MTT法觀察轉(zhuǎn)染野生型p53對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，并在電鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化。結(jié)果表明，hTERT啟動(dòng)子調(diào)控p53基因表達(dá)使細(xì)胞凋亡率明顯升高(24、48h凋亡率：實(shí)驗(yàn)組15.42％、36.57％；轉(zhuǎn)染EGFP組5.16％、8.19％；陰性對(duì)照組4.49％、7.18％)，細(xì)胞