腎小管間質纖維化大鼠MMP-9-TIMP-1的表達及桂枝茯苓膠囊對其影響.pdf

1、目的:腎小管間質纖維化(tubulointerstitial fibrosis，TIF)是幾乎所有腎臟疾病發(fā)展至終末期腎衰的共同病理表現(xiàn)。研究證實，基質金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)和金屬蛋白酶組織抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1) 的表達與活性異常在小管間質損傷過程中發(fā)揮重要作用。近年來發(fā)現(xiàn)桂枝茯苓丸在部分腎臟

2、損傷中起保護作用，其機制尚待進一步證實。本實驗旨在通過單側輸尿管梗阻誘導TIF動物模型，觀察MMP-9、TIMP-1在TIF過程中的表達以及桂枝茯苓膠囊(其成分同桂枝茯苓丸，主要由桂枝、茯苓、芍藥、牡丹皮、桃仁等組成)對MMP-9、TIMP-1表達的影響，并初步探討桂枝茯苓膠囊腎臟保護作用的可能機制。 方法：雄性3月齡SD大鼠72只，隨機分為：假手術組(24只)，模型組(24只)，預防組(24只)。行單側輸尿管結扎術建立單側輸尿

3、管梗阻(unilateral ureteral obstruction，UU0)誘導腎小管間質纖維化模型。預防組大鼠加以125mg/kg桂枝茯苓膠囊溶于生理鹽水灌胃，日兩次，模型組及假手術組大鼠每天以等體積生理鹽水灌胃。分別于實驗第7天、14天、21天時各組隨機處死8只大鼠，行功能學檢測、光鏡下觀察腎臟組織病理學改變、免疫組織化學法(SABC法)評價腎臟MMP-9、TIMP-1的表達變化。結果①7天及14天時模型組、預防組大鼠血BUN、

4、Cr與同時間點假手術組比較無顯著差異。21天時，模型組、預防組血BUN、Cr均較假手術組明顯升高(P<0．01)，模型組、預防組大鼠血BUN、Cr較前一時間點明顯升高(P<0．01)，且模型組較預防組升高(P<0．05，P<0．01)。各時間點假手術組大鼠血BUN、Cr無明顯變化。②7天時模型組、預防組即有腎小管間質損害；模型組、預防組自身對照腎小管間質損害均較前一時間點加重(P<0．01)， 7天、14天、21天時預防組腎小管間質損害

5、均較模型組為輕(P<0．01)。③7天時模型組、預防組大鼠腎臟MMP-9表達量升高，至14天時達高峰，之后下降，但21天時模型組、預防組大鼠腎臟MMP-9表達仍高于假手術組(P<0．01)，14天、21天時預防組均高于模型組(P<0．01)，而7天時預防組MMP-9表達低于模型組(P<0．01)。④各時間點模型組、預防組大鼠腎臟TIMP-1的表達均高于假手術組(P<0．01)，且預防組均低于模型組(P<0．01)，模型組、預防組自身對照

6、均較前一時間點升高(P<0．01)，21天時表達量最高。⑤腎小管間質損害與TIMP-1表達量呈正相關(r=0．901，P<0．01)，與MMP-9/TIMP-1比值呈負相關(r=-0．937，P<0．01)。 結論：桂枝茯苓膠囊能減輕梗阻腎組織的病理損害，延緩腎小管間質纖維化的進程。TIMP-1可能是腎間質纖維化形成的促進因素之一并參與了纖維化形成的全過程。MMP-9/TIMP-1比值的下降參與了TIF的發(fā)生機理。桂枝茯苓膠囊可