鹽酸吸入性ALI-ARDS大鼠肺組織水通道蛋白1、5的變化及呼氣末正壓通氣對其影響.pdf

1、目的：觀察肺組織水通道蛋白1（AQP1）和水通道蛋白5（AQP5）在大鼠鹽酸吸入性ALI/ARDS模型中的含量變化以及不同呼氣末正壓通氣對其影響，探討鹽酸吸入性ALI/ARDS肺水腫的發(fā)生機(jī)制以及呼吸機(jī)治療對其影響途徑。
　　方法：通過氣管內(nèi)吸入鹽酸（0.1 mol/L，2ml/kg）建立大鼠 ALI/ARDS模型。48只成年健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為6組，每組8只：對照組（只行氣管切開，不注射鹽酸）、鹽酸（HCL）組（氣管內(nèi)注入鹽

2、酸）、機(jī)械通氣組（鹽酸吸入后立即行機(jī)械通氣，按呼吸末正壓分別為0cmH2O、1cmH2O、3cmH2O、5cmH2O,將該組再分為P0、P1、P3、P5四個(gè)亞組，每組8只）。呼吸機(jī)余參數(shù)設(shè)置如下：潮氣量（VT）=4ml/kg、呼吸頻率(R)=70次/分、吸呼比（I:E）=1：2、吸入氧濃度（FiO2）=21％。鹽酸吸入后6小時(shí)為實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)。測定大鼠動(dòng)脈血氧分壓（PaO2）并計(jì)算氧合指數(shù)（PaO2/Fi02）、肺組織濕干重比（W/D）；光鏡

3、下觀察肺組織病理改變,并計(jì)算肺損傷指數(shù)；免疫組織化學(xué)方法檢測肺組織 AQP1、5表達(dá)部位;酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定肺組織勻漿AQP1、5含量;熒光實(shí)時(shí)定量PCR法（real-time PCR）檢測肺組織AQP1mRNA和AQP5mRNA的表達(dá)；計(jì)算肺組織AQP1和AQP5含量與肺組織W/D相關(guān)性。
　　結(jié)果：大鼠在吸入鹽酸后很快出現(xiàn)呼吸窘迫并進(jìn)行性加重，發(fā)紺，肺組織病理見肺間質(zhì)明顯水腫，肺泡間隔增寬，肺泡腔內(nèi)有大量水腫液。

4、與對照組比較，HCL組肺組織 W/D比值（6.06±0.36 vs4.28±0.20，P=0.000）及肺損傷指數(shù)（9.63±1.60 vs1.25±0.46，P=0.000）均顯著升高，氧合指數(shù)明顯降低[（224±25）mmHg vs（416±19）mmHg，P=0.000]；鹽酸組肺組織勻漿AQP1、5含量明顯低于對照組[（1.18±0.19）μg/L vs（2.08±0.34）μg/L；(531±41) ng/L vs（658±2

5、4) ng/L,均P=0.000]，肺組織勻漿AQP1 mRNA和AQP5mRNA的表達(dá)也低于正常組大鼠[8.92±4.60vs15.50±3.25,P=0.008）；(7.62±2.49 vs14.06±2.27,P=0.004)]。AQP1主要表達(dá)于肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞及肺泡上皮細(xì)胞，AQP5則主要表達(dá)于肺泡上皮細(xì)胞。HCL組肺組織AQP1、5的表達(dá)強(qiáng)度較對照組明顯減少。與HCL組比較，P3和P5組病理見肺水腫明顯減輕，肺損傷指數(shù)（均P

6、=0.001,0.000）及W/D（均P=0.000,0.000）均降低，肺組織勻漿AQP1、5含量（分別 P=0.002，0.000；P=0.004,0.000）和mRNA的表達(dá)（P=0.045,0.027；P=0.049,0.004）均明顯增加，以 P5組最明顯，但二者均未達(dá)到正常組水平(P<0.05)。HCL組大鼠肺組織勻漿AQP1和AQP5含量與肺組織濕干比呈顯著負(fù)相關(guān)（分別r=-0.951，P=0.000；r=-0.964，P