豬苓質(zhì)量控制及其利水功效在bbn誘導(dǎo)的大鼠膀胱癌治療中機(jī)制研究

1、分類號學(xué)校代號10572UDC密級學(xué)號070100126廣州中醫(yī)藥大學(xué)GuangzhouUniversityofChineseMedicineGuangzhouUniversityofChineseMedicine博士學(xué)位論文豬苓質(zhì)量控制及其利水功效在豬苓質(zhì)量控制及其利水功效在BBNBBN誘導(dǎo)的大鼠膀胱癌治療中機(jī)制研究導(dǎo)的大鼠膀胱癌治療中機(jī)制研究學(xué)位申請人張國偉張國偉指導(dǎo)教師姓名曾星曾星專業(yè)名稱中藥學(xué)中藥學(xué)申請學(xué)位類型科學(xué)學(xué)位科學(xué)學(xué)位論

2、文提交日期20102010年5月萬方數(shù)據(jù)i中文摘要中文摘要背景膀胱癌是泌尿系統(tǒng)常見的腫瘤，難治療，復(fù)發(fā)率高。目前治療膀胱癌常用藥物為卡介苗，但卡介苗毒副作用明顯。泌尿系統(tǒng)常用中藥豬苓功效為利水滲濕，已有研究顯示豬苓可顯著抑制大鼠膀胱癌的發(fā)生。本課題組前期研究表明，豬苓中有效成分豬苓多糖對體外實(shí)驗(yàn)性膀胱腫瘤有抑制作用，其途徑可能主要是調(diào)控機(jī)體非特異性免疫作用。但未見有關(guān)豬苓利水功效在膀胱癌治療中具體機(jī)理研究，豬苓對水通道蛋白及Ⅱ相酶調(diào)節(jié)作

3、用也未見前期研究。本課題主要研究豬苓利水功效在卡介苗對膀胱癌的治療作用中部分減毒作用機(jī)制，并多豬苓對Ⅱ相酶作用做初步探討。目的1研究豬苓中豬苓多糖及此豬苓多糖主要甲醇部位相對分子量分布、組成及含量，研究使用硫酸蒽酮分光光度法測豬苓中豬苓多糖含量，并探討有關(guān)實(shí)驗(yàn)條件對測定結(jié)果的影響。2研究豬苓利尿作用，對尿電解質(zhì)作用及對腎臟髓質(zhì)及膀胱中AQPs作用，探討其利尿作用機(jī)理。3研究豬苓、豬苓多糖及聯(lián)用卡介苗防治BBN聯(lián)合糖精誘導(dǎo)雌性F344膀胱

4、癌大鼠作用，明確其藥效學(xué)研究。4探討豬苓及豬苓多糖干預(yù)后腎臟髓質(zhì)及膀胱中AQPs作用，初步探討豬苓及豬苓多糖干預(yù)后實(shí)驗(yàn)鼠肝臟及膀胱中Ⅱ相酶活性變化方法1采用水提醇沉法制備豬苓粗多糖，通過Sevag法除蛋白后再次醇沉并通過透析和冷凍干燥制備純化的豬苓多糖，通過凝膠滲透色譜及HPLC法對純化豬苓多糖的相對分子量分布、組成及含量進(jìn)行研究。為簡化豬苓多糖測量手段，使用硫酸蒽酮分光光度法測豬苓中豬苓多糖含量，并探討有關(guān)實(shí)驗(yàn)條件對測定結(jié)果的影響。2

5、篩選出測量尿量、尿Na、尿K，尿Cl的正常值范圍SD大鼠30只，分為5組，每組6只，分為5組，即生理鹽水組，呋塞米組，豬苓50mgkg組，豬苓250mgkg組豬苓500mgkg組，經(jīng)口給藥，分別在給藥24h及8d后收集尿液，記錄尿量，檢測尿Na、尿K，尿Cl濃度，以RTPCR方法測定腎髓質(zhì)中AQP1，AQP2，AQP3V2RmRNA含量變化及膀胱中AQP1，AQP3mRNA含量變化。3膀胱癌模型制作及豬苓及豬苓多糖干預(yù)后研究(1)模型制