16912.鹽脅迫下甜菜蛋白質(zhì)含量測(cè)定及特異蛋白的分離與鑒定_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、中文摘要鹽脅迫是影響植物生長(zhǎng)發(fā)育的主要環(huán)境因子之一。甜菜耐鹽性強(qiáng)主要表現(xiàn)在它比其它作物有更強(qiáng)的吸收或容納Na十的能力。蛋白質(zhì)是生物體行使其生理功能的基本單位,也是生命代謝活動(dòng)的直接體現(xiàn)者,對(duì)其功能進(jìn)行分析和鑒定將會(huì)對(duì)闡明基因的功能起到推動(dòng)作用,并且能夠更加客觀準(zhǔn)確的揭示生命現(xiàn)象。本研究以耐鹽型T510品系和鹽敏感型210品系甜菜為研究對(duì)象,通過對(duì)甜菜葉片總蛋白提取方式及電泳條件的優(yōu)化,最終可獲得高分辨率、重復(fù)性好的耐鹽型T510品系和鹽

2、敏感型210品系的2一DE圖譜。通過軟件分別將兩個(gè)品系的280mmol/LNaCl溶液處理組與對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比,T510中可匹配的蛋白點(diǎn)共607個(gè),210中共有317個(gè)。通過蛋白點(diǎn)表達(dá)量的計(jì)算,T5lO中有15個(gè)受鹽脅迫影響而變化顯著的蛋白質(zhì)點(diǎn),在鹽脅迫處理中表達(dá)豐度減弱的蛋白質(zhì)點(diǎn)有8個(gè),表達(dá)豐度增強(qiáng)的蛋白質(zhì)點(diǎn)有7個(gè),其中有2個(gè)差異表達(dá)蛋白點(diǎn)鑒定出未知蛋白;在210品系中有12個(gè)受鹽脅迫影響而變化顯著的蛋白質(zhì)點(diǎn),與對(duì)照組相比,在鹽脅迫處理

3、中表達(dá)豐度減弱的蛋白質(zhì)點(diǎn)有3個(gè),表達(dá)豐度增強(qiáng)的蛋白質(zhì)點(diǎn)有9個(gè),其中有1個(gè)差異表達(dá)蛋白點(diǎn)鑒定出未知蛋白,有2個(gè)差異表達(dá)蛋白點(diǎn)鑒定出2種蛋白(PO05)。對(duì)兩個(gè)品系鹽脅迫處理的雙向電泳圖譜進(jìn)行分析,有288個(gè)點(diǎn)相匹配,3個(gè)差異點(diǎn)(210品系中點(diǎn)5和點(diǎn)13、T5lO品系中點(diǎn)11)。210品系中的點(diǎn)5在鹽脅迫處理中下調(diào)表達(dá),相對(duì)應(yīng)的蛋白點(diǎn)在T510品系中上調(diào)表達(dá);2lO品系中的點(diǎn)13在鹽脅迫處理中下調(diào)表達(dá),在T510中缺失;T510品系的點(diǎn)11

4、在鹽脅迫處理中下調(diào)表達(dá),相對(duì)應(yīng)的蛋白點(diǎn)在210品系鹽脅迫處理中上調(diào)表達(dá)。28個(gè)差異表達(dá)蛋白點(diǎn)經(jīng)扣取、膠內(nèi)酶解、MALDITOF/TOF質(zhì)譜鑒定后,1個(gè)點(diǎn)未被成功鑒定(210品系,點(diǎn)13),其余27個(gè)點(diǎn)均被成功鑒定。關(guān)鍵詞:甜菜;鹽脅迫;特異蛋自l●AbstractsaltStressis。ne。ftheenvir。mr。mentalfact。rsthathaveaninnuence。nthe野。wchanddevel。pmentofpl

5、amsThatthebeethasstr。ngsalttoleranceisrenectedinthattllebeethasS仃ongerabilitytoabsorborh01dNathanotherplan‘s。ProteinisthebasicunitthatorganismmakesitsphysiologicalfunctionworkAnditembodvsthemetabolicactivitiesof1ifedrect

6、lyToanalyzeandappraiseltsfunctloncangiveagreatpuShtoclarifythegenefunctionandcanreVeal1ifephenomenonmoreobjectivelyandaccuratelyInthisstudy,salt—resiStingT51Ostrainsandsalt—sensitiVe21Ostrainsofbeetasthemainsubject,byopt

7、imizingtheex仃actionofBeetleaVes’totalprotemandelec們Dhoresisconditions,wecallultimatelygainhi曲res01ution,reproducible2_DEmapsofsaltresiStingT51Ostrainsandsalt—sensitiVe2lOs乜ainsByso士=twarecomp赫ng鉚。她ins280mmol/LNaClStress鏟

8、oupwithcontrol鏟oup,也ereare607proteinspotst11atmatchT510and317for210Bythecalculationoftheprotemspots,thereare15proteinspotsintheT51Ochangedbecausetheyarea虢ctedbysalts仃ess,8proteinSpotsofexpreSSabundanceint11esalts扛esstrea

9、衄entswereweakened,meanⅥ電ile7proteinspotsofeXpressabundanceinthesaltS仃esstreaJ缸nentswerestren礎(chǔ)ened,t、vodifrerentiallyexpressedproteinspotsofthemidentmedasunl(Ilownprotein;therearel2proteinSpotsinthe210s訂ainschaIlgedbecaus

10、etheyarea舵ctedbysaltstressComparedwith也econtrol伊oup,3proteinSpotSoteXpressabundallcein也esaltstresstreatmentsareweakened,8areStrengthened,onedi目[色rentiallyexpressedproteinspotsofthemidentifiedasunknownproteln,“Vodiffer苫nt

11、iallyexpressedproteinspotsofthemidenti矗edtwotypesofprotein口O05)Bvanalysisingt11e鉚odimensionalgelelectrophoresisoft、ⅣoStrainsofsaltStress,wefind288proteinspotscanbematchedand3can’t(points5and13in210Strains,p0Int11㈨4㈣5吣4㈣2

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