廣西豬瘟流行毒株生長(zhǎng)特性的初步研究.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)采用RT-PCR技術(shù)對(duì)該實(shí)驗(yàn)室保存的8份廣西各地的豬瘟病豬的脾臟和淋巴結(jié)進(jìn)行診斷,檢出其中3份為CSF陽性,分別來自廣西梧州、博白和北海地區(qū).以這3株豬瘟野毒和中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)石門株病毒、疫苗毒為材料,研究其在宿主體內(nèi)和體外PK-15細(xì)胞中增殖的基本特性和差異.該實(shí)驗(yàn)中,3株豬瘟野毒和石門株病毒在宿主體內(nèi)增殖時(shí),CSFV石門株和梧州株引起豬體發(fā)病的體溫變化、臨床癥狀和病理變化相似,都為"典型"豬瘟.病豬體溫呈稽留熱,高達(dá)41℃,病理變化較

2、典型.CSFV博白株和北海株在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中引起豬只發(fā)病的臨床癥狀為"非典型",病豬體溫呈張馳熱,在體溫上升至40.5℃后恢復(fù)正常,而后又上升.病豬病程長(zhǎng),病理變化典型.該實(shí)驗(yàn)用間接免疫熒光和免疫酶檢測(cè)PK-15細(xì)胞中的豬瘟病毒抗原,發(fā)現(xiàn)其主要存在于細(xì)胞的核膜以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體富集的區(qū)域.用免疫酶試驗(yàn)測(cè)定各CSFV毒株的TCID50,以各CSFV毒株的200 TCID50的量接種PK-15細(xì)胞,在12h、24h、36h、48h、60h、7

3、2h和96h分別收獲上清中的病毒和與細(xì)胞結(jié)合的病毒,并測(cè)定病毒滴度,繪制病毒生長(zhǎng)曲線,從而研究各CSFV毒株在體外PK-15細(xì)胞的生長(zhǎng)特性.其中CSFV博白株和CSFV疫苗株在60h和72h時(shí)釋放到上清中的病毒粒子達(dá)到最高峰,為10<'7.3>/ml和10<'7>/ml;CSFV石門株和CSFV梧州株次之,為10<'6.3>/ml和10<'5.8>/ml;CSFV北海株最低,只有10<'5>/ml.在與細(xì)胞結(jié)合病毒的增殖過程中,各CSF