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1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文aA晶體蛋白基因啟動(dòng)子與HSP16.3融合基因表達(dá)載體構(gòu)建及其在大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的表達(dá)姓名：朱紹玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：葛正龍20100501遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文ⅡA晶體蛋白基因啟動(dòng)子與HSPl63融合基因表達(dá)載體構(gòu)建及其在大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的表達(dá)ThefusiongeneexpressionvectorconstructionofaAcrystallinpromoterandH
2、SPl63geneanditsexpressioninratlensepitheliumcellsObjective：ThisprojectistoconstructthefusiongeneexpressionvectorofaAcrystallinpromoterandheatshockprotein163gene，andtodetectedtheexpressionofthefusiongeneinratlensepitheliu
3、mcellsMethods：HSPl63genewasamplifiedfrompET9d—HSP163byPCRandclonedintopBluescriptpBluescript—HSP163andpaACP—IRES2EGFPwerebothdoubledigestedandrecombinedaspaACPHSP163Restrictivedigestion，PCRandsequencingwereusedtoconfirmt
4、herecombinantplasmidconstructionPurifiedplasmidwasretrobulbarinjectedintorat1ellsTheEGFPgeneexpressioninthefrozensectionoftheratlenswasobservedbyfluorescentmicroscopeThemRNAexpressionofexogenousHSP163geneinratlenswasdete
5、ctedbyreversetranscriptPCRResults：Theconstructedrecombiantplasmid，paACP—HSP163，hada435bpfragmentofHSPl63gene，andthe435bpfragmentsequencedemonstrated100％homologywithHSP163genefromGenBankGreenfluorescencecanbeobservedinrat
6、lensafterinjectingpaACPHSPl63，butnearlyundetectedinotherpartsoftheeyeballTheHSP163mRNAexpressionexistedinlensepitheliumcellsofratinjectedpttACPHSPl63Conclusion：ThespecificexpressionvectorpromotedbyaACrystallin，paACP—HSP1
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