防御素基因克隆及其表達(dá)載體構(gòu)建.pdf_第1頁(yè)
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1、人防御素是一類廣譜抗菌陽(yáng)離子小肽的總稱,一般具有3~4個(gè)分子內(nèi)二硫鍵.防御素對(duì)于細(xì)菌、真菌乃至某些被膜病毒有廣譜殺傷作用,是免疫系統(tǒng)中的重要組分.該實(shí)驗(yàn)根據(jù)已發(fā)表的HNP-1 cDNA序列,設(shè)計(jì)并合成了一對(duì)引物.以HL-60細(xì)胞總RNA為模板,利用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增目的片段并克隆到pUC18載體上,經(jīng)篩選獲得陽(yáng)性重組子pUC18-HNP-1(pDFS1).測(cè)序分析證實(shí),擴(kuò)增片段即為HNP-1cDNA.pDFS1再經(jīng)SmaI與SalI酶

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