A群豬輪狀病毒OSU株VP7基因的克隆及其在桿狀病毒中的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究用恒河猴胚腎細胞（MA-104細胞系）繁殖并擴增了A群PRV G5型標準毒株OSU.根據Genebank已發(fā)表的PRV VP7基因cNNA序列,利用Oligo4.1軟件設計并合成一對引物,通過反轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）擴增出長約1.0kb的基因片段,命名為VP7.將其克隆至PMD-18T載體,構建了重組質粒PMD-18T-VP7.對PMD-18T-VP7中進行序列測定,并將測序結果同仔豬多發(fā)的其它四個G血清型代表毒株（G

2、9型ICB2185株、G10型P343株、G4型Gottfried株、G2型-C134株）及OSU-1株（參考序列）的VP7基因進行了序列比較.與OSU-1株的核苷酸和氨基酸同源性分別為99.4﹪和99.7﹪.與其它四個毒株的核苷酸同源性分別為77.9﹪、71.7﹪、75.3﹪、87.7﹪;推導的編碼氨基酸同源性分別為83.1﹪、87.1﹪、84.7﹪、96.3﹪.VP7基因的真核表達,為進一步研究PRV VP7蛋白的結構和功能,研制P

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