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文檔簡介
1、近年來，牡蠣包納米蟲病在歐洲等地頻發(fā)，引起牡蠣大范圍的死亡，對牡蠣養(yǎng)殖業(yè)危害極大。目前關(guān)于包納米蟲的研究處于初級階段，病原體外培養(yǎng)技術(shù)的缺乏是阻礙深入研究包納米蟲的致病機(jī)理、蟲體與宿主的相互作用及疫病防控的重要瓶頸。
本研究主要包括三部分內(nèi)容：1、取經(jīng)PCR初步鑒定的包納米蟲病陽性牡蠣全組織直接培養(yǎng)，體外培養(yǎng)一個(gè)月后，采用原位雜交、熒光原位雜交方法對培養(yǎng)的包納米蟲進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明:此培養(yǎng)方法能在體外成功傳遞培養(yǎng)三代牡蠣包納米
2、蟲，并最終獲取了大量蟲體。2、采用密度梯度離心法對培養(yǎng)的牡蠣包納米蟲進(jìn)行純化，并利用熒光定量PCR方法對Percoll純化的六層沉淀中所含蟲體進(jìn)行定量測定。結(jié)果表明：各界面的包納米蟲含量不等，其數(shù)量在9.63%（60%～70%界面）到29.08%（30%界面）之間，各層中存活的牡蠣包納米蟲至少為22.7%。3、以純化的牡蠣包納米蟲為抗原免疫小鼠，獲得了牡蠣包納米蟲多克隆抗體。利用Western blot技術(shù)，證明此多克隆抗體確為牡蠣包納
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