美國(guó)山核桃組織培養(yǎng)技術(shù)的研究.pdf

1、本文選用美國(guó)山核桃實(shí)驗(yàn)室實(shí)生苗和成年樹(shù)的葉片、帶芽莖段為實(shí)驗(yàn)材料，對(duì)葉片和莖段組織培養(yǎng)從外植體的選擇、最佳培養(yǎng)基的篩選、最佳植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及其配比以及其他一些影響植物組織培養(yǎng)的因素做了較系統(tǒng)地研究。主要結(jié)果如下：
　　 1美國(guó)山核桃葉片組織培養(yǎng)中，選用一年生實(shí)生苗葉片和DKW培養(yǎng)基愈傷組織誘導(dǎo)率較高。使用75％的酒精快速消毒10s后，再用0.1％HgCl2浸泡4min可降低污染率，并且每瓶培養(yǎng)基接種1～2塊外植體可以有效減少污染

2、率。
　　 2美國(guó)山核桃葉片組織培養(yǎng)中，在培養(yǎng)基中添加NAA0.1.5mg/L+2，4-D0.5mg/L+6-BA1.5mg/L，美國(guó)山核桃葉片組織培養(yǎng)褐化率降低，在培養(yǎng)基中添加NAA0.1 mg/L+2，4-D1.5 mg/L+6-BA2.0mg/L可使美國(guó)山核桃愈傷組織誘導(dǎo)率較高，培養(yǎng)基的其他添加成分為：蔗糖30g/L，瓊脂10g/L，調(diào)節(jié)pH=5.8。
　　 3在進(jìn)行美國(guó)山核桃葉片組織培養(yǎng)時(shí)，為抑制外植體褐變反應(yīng)，

3、可將經(jīng)過(guò)常規(guī)消毒的外植體接種到只含有蔗糖和瓊脂的培養(yǎng)基中培養(yǎng)2d左右再將其轉(zhuǎn)移到DKW+NAA0.10mg/L+2，4-D1.5mg/L+6-BA2.0mg/L中繼續(xù)培養(yǎng)可以有效的降低外植體的褐化率。
　　 4在培養(yǎng)基中分別添加1.0g/L的AC、1.5mg/L的Na2S2O3、0.02mg/LPVP的都可以有效的降低外植體的褐化率，同時(shí)不影響愈傷組織的誘導(dǎo)。其中，添加Na2S2O3外植體褐化率最低，添加PVP誘導(dǎo)率較高。添加G

4、A3會(huì)抑制美國(guó)山核桃葉片組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中愈傷組織的誘導(dǎo)。
　　 5在接種前使用400mg/L的PVP或200mg/L的Na2S2O3浸泡試材可以有效降低美國(guó)山核桃葉片組織培養(yǎng)降低試材褐化率。對(duì)接種后的培養(yǎng)基先進(jìn)行完全遮光處理培養(yǎng)一周后再進(jìn)行光培養(yǎng)，對(duì)抑制外植體的褐化反應(yīng)起了積極的作用，可以有效地降低試材的褐化率。
　　 6適宜美國(guó)山核桃葉片愈傷組織增殖的最佳培養(yǎng)和激素組合為：DKW+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg

5、/L，蔗糖30g/L，瓊脂10g/L，pH=5.8。
　　 7在美國(guó)山核桃莖段組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，一般選用幼齡莖段進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，篩選出適合莖段愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基和激素配比為WPM+NAA1.0mg/L+6-BA3.0 mg/L，添加30g/L蔗糖，10g/L瓊脂，調(diào)節(jié)pH=5.8。
　　 8降低美國(guó)山核桃莖段組織培養(yǎng)中外植體褐化的方法有：①培養(yǎng)基中添加1.0mg/L的活性炭；②使用400mg/L的PVP或300mg/L的Na2